一、細胞簡介

細胞簡介

該細胞來源于人的子宮組織樣本。

子宮內膜異位癥是婦科常見疾病，可影響5-10%的育齡期婦女，在不孕癥患者中患病率高達20-50%，雖為良性疾病，缺具有無限生長、生成新生血管、浸潤并破壞周圍組織、局部或遠處轉移等惡性腫瘤的一些特性。間充質干細胞(mesenchymal stem cells，MSCs)來源于胚胎時期的中胚層組織，具有很強的自我復制和多向分化潛能，具有向脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞及肌細胞等多種終末細胞定向分化的能力，運用 MSCs來修復軟骨損傷具有很好的應用前景，目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質干細胞。體外培養(yǎng)的子宮內膜干細胞細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

細胞名稱

人原代子宮內膜異位癥間充質干細胞

細胞別稱

Human primary endometrial stromal stem cells

細胞貨號

Delf-18016

來源

人；子宮

細胞形態(tài)

長梭形，不規(guī)則細胞

生長特性

貼壁培養(yǎng)

鑒定報告

提供免疫熒光鑒定(波形蛋白 Vimentin 免疫熒光染色為陽性)

培養(yǎng)條件

推薦使用人原代子宮內膜異位癥間充質干細胞專用培養(yǎng)基（貨號：Delf-26341）來培養(yǎng)該細胞。

名稱

體積

濃度

保存條件

人原代子宮內膜異位癥間充質干細胞基礎培養(yǎng)基

500mL

1×

4℃、避光

人原代子宮內膜異位癥間充質干細胞培養(yǎng)添加劑

25mL

20×

-20℃、避光

培養(yǎng)環(huán)境

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

二、細胞復蘇方法

復蘇步驟

1、將凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍；
2、加入到含4-6mL基礎培養(yǎng)基（含10%FBS）的離心管中混合均勻；
3、在1000RPM條件下離心5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞；
4、將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)；

三、細胞傳代方法

傳代比例

1:2（具體情況視細胞生長速度及密度決定）

傳代方法

1、盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；
2、用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次，吸走潤洗的PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化（1到2分鐘，難消化的細胞適當增加時間）；
5、消化到細胞大部分變圓并脫落，輕敲培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的基礎培養(yǎng)基終止消化；
6、混勻細胞吸出，1000rpm離心5min，棄上清；補加1-2ml完培吹勻；
7、按1:2分配到新的培養(yǎng)瓶中，添加6-8ml完培保持細胞生長；

注意事項

不同品牌胰酶消化時間差別較大，可根據(jù)細胞形態(tài)判斷消化進程

四、注意事項

注意事項

1、所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2、建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。

3、本產(chǎn)品僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。

細胞培養(yǎng)清除試劑