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腺病毒包裝服務(wù)

腺病毒包裝服務(wù)，技術(shù)背景腺病毒是一種線性雙鏈DNA病毒，具有宿主范圍廣，可感染分裂和非分裂細(xì)胞，制備滴度高、裝載外源基因容量大等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛用于生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究和臨床試驗(yàn)中，成為目前最常用的基因治療載體之一。我司腺病毒系統(tǒng)采用體外同源重組的方式，重組效率更好，包裝更高效快捷。我司提供的重組腺病毒為復(fù)制缺陷型病毒，不整合到宿主基因組，無(wú)插入致突變性，安全性良好。服務(wù)特點(diǎn)1、多樣的穿梭載體：分別攜帶不同的熒光或抗生素......

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產(chǎn)品詳情

技術(shù)背景

腺病毒是一種線性雙鏈DNA病毒，具有宿主范圍廣，可感染分裂和非分裂細(xì)胞，制備滴度高、裝載外源基因容量大等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛用于生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究和臨床試驗(yàn)中，成為目前最常用的基因治療載體之一。我司腺病毒系統(tǒng)采用體外同源重組的方式，重組效率更好，包裝更高效快捷。我司提供的重組腺病毒為復(fù)制缺陷型病毒，不整合到宿主基因組，無(wú)插入致突變性，安全性良好。

服務(wù)特點(diǎn)

1、多樣的穿梭載體：分別攜帶不同的熒光或抗生素篩選標(biāo)記，滿足不同客戶需求；

2、病毒滴度高，純度好：最高可制備1×10¹¹PFU/ml的病毒，且經(jīng)氯化銫梯度離心，純度更高；

3、提供不同級(jí)別病毒：可分別制備細(xì)胞級(jí)別、動(dòng)物級(jí)別及臨床級(jí)別的腺病毒。

服務(wù)價(jià)格與周期

ShRNA重組腺病毒包裝（10⁹pfu/ml滴度，1ml）

1、單靶點(diǎn)ShRNA重組腺病毒包裝 20工作日

2、ShRNA重組腺病毒包裝（含3個(gè)靶點(diǎn)+對(duì)照） 20工作日

基因過(guò)表達(dá)腺病毒包裝（10⁹pfu/ml滴度，1ml）

1、目的基因長(zhǎng)度:<2000bp 20-30工作日

2、目的基因長(zhǎng)度:2001-3000bp 20-30工作日

3、目的基因長(zhǎng)度:3001-4000bp 30-40工作日

4、目的基因長(zhǎng)度:>4000bp 咨詢

腺病毒擴(kuò)增（109pfu/ml滴度，1ml） 10-15工作日

腺病毒純化與濃縮（1011pfu/ml滴度）

1、ShRNA重組腺病毒 15-20工作日

2、基因過(guò)表達(dá)重組腺病毒 15-20工作日

腺病毒純化與濃縮（1011pfu/ml滴度）

1、rAd-shNC(ShRNA陰性對(duì)照病毒) 現(xiàn)貨

2、rAd-EGFP 現(xiàn)貨

3、rAd-RFP 現(xiàn)貨

4、rAd-KB 現(xiàn)貨

服務(wù)說(shuō)明

1、客戶需提供所需包裝的目的基因或shRNA序列信息，如需將外源片段構(gòu)建至穿梭載體，則實(shí)驗(yàn)費(fèi)用另計(jì)，請(qǐng)參考“基因亞克隆”服務(wù)；

2、致癌基因及毒基因等對(duì)人體有危害或危害作用不明確的基因暫不提供腺病毒包裝服務(wù)；

3、病毒包裝前，建議客戶預(yù)先確定實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)細(xì)胞的腺病毒感染效率能滿足后續(xù)要求，提高實(shí)驗(yàn)的效率；

常見(jiàn)問(wèn)題

問(wèn)：細(xì)胞的運(yùn)輸方式有哪些？有什么區(qū)別？

答：公司提供兩種運(yùn)輸方式供老師選擇，1、復(fù)蘇的活細(xì)胞：采用常溫發(fā)貨的方式，收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢(shì)是省去復(fù)蘇的步驟，細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞：采用干冰運(yùn)輸，一般情況下發(fā)貨是2支凍存管，收到后放-80過(guò)夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮長(zhǎng)期存儲(chǔ)，擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢(shì)是發(fā)貨快，一般一兩天即可收到，缺點(diǎn)是需要自己復(fù)蘇。

問(wèn)：為什么你們的細(xì)胞和其他公司的細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣？

答：我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫(kù)的培養(yǎng)信息，如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺(tái)。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案，根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇！

問(wèn)：培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復(fù)使用嗎？

答：不可以重復(fù)使用，一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出，充液的培養(yǎng)基血清比例會(huì)比正常培養(yǎng)時(shí)所用到的培養(yǎng)液低很多，通常在3-5%，以維持細(xì)胞存活，控制生長(zhǎng)速度，不可以用來(lái)做細(xì)胞培養(yǎng)使用。

問(wèn)：培養(yǎng)細(xì)胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點(diǎn)是什么？

答：細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點(diǎn)點(diǎn)，一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物，懸浮細(xì)胞也會(huì)有這種現(xiàn)象，出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點(diǎn)。通常，白色的圓點(diǎn)是分散分布的，聚團(tuán)類的懸浮細(xì)胞可能會(huì)聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑，技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

問(wèn)：剛買回來(lái)的細(xì)胞如何凍存留種呢？

答：一般情況下，我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種，可先凍存1-2支凍存管，凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些，便于后期復(fù)蘇。購(gòu)買原代細(xì)胞的客戶，要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制，人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右，鼠源的可以傳3代左右，對(duì)于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞，不建議凍存，收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實(shí)驗(yàn)。