當(dāng)前位置：首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 技術(shù)服務(wù) > 分子檢測(cè) > 雙熒光素酶檢測(cè)

雙熒光素酶檢測(cè)

雙熒光素酶檢測(cè)，報(bào)告基因(reportergene)是一種編碼可被檢測(cè)的蛋白質(zhì)或酶的基因，也就是說，是一個(gè)其表達(dá)產(chǎn)物非常容易被鑒定的基因。把它的編碼序列和基因表達(dá)調(diào)節(jié)序列相融合形成嵌合基因，或與其它目的基因相融合，在調(diào)控序列控制下進(jìn)行表達(dá)，從而利用它的表達(dá)產(chǎn)物來標(biāo)定目的基因的表達(dá)調(diào)控。本實(shí)驗(yàn)采用螢火蟲螢光素酶(FireflyLuciferase)和海腎螢光素酶(RellinaLuciferase)組成雙螢光素酶報(bào)......

折扣咨詢在線咨詢

產(chǎn)品推薦

聯(lián)系方式

電話：
400-1016-218
郵箱：
355185756@qq.com
地址：
安徽省合肥市高新區(qū)黃山路602號(hào)合肥國(guó)家大學(xué)科技園A401室

產(chǎn)品詳情

報(bào)告基因 (reporter gene)是一種編碼可被檢測(cè)的蛋白質(zhì)或酶的基因，也就是說，是一個(gè)其表達(dá)產(chǎn)物非常容易被鑒定的基因。把它的編碼序列和基因表達(dá)調(diào)節(jié)序列相融合形成嵌合基因，或與其它目的基因相融合，在調(diào)控序列控制下進(jìn)行表達(dá)，從而利用它的表達(dá)產(chǎn)物來標(biāo)定目的基因的表達(dá)調(diào)控。

本實(shí)驗(yàn)采用螢火蟲螢光素酶(Firefly Luciferase)和海腎螢光素酶(Rellina Luciferase)組成雙螢光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)系統(tǒng)(Dual-Luciferase Reporter Assay)。通過加入特定的螢光素酶底物，螢光素酶與底物反應(yīng)過程中會(huì)發(fā)出生物螢光，然后可以通過化學(xué)發(fā)光儀測(cè)定反應(yīng)過程中釋放的生物螢光，從而比較不同組間基因表達(dá)的差異。

雙熒光素酶實(shí)驗(yàn)流程圖

我們的優(yōu)勢(shì)：

1. 高環(huán)評(píng)、標(biāo)準(zhǔn)化、開放式實(shí)驗(yàn)室，客戶可全程跟蹤實(shí)驗(yàn)；

2. 標(biāo)準(zhǔn)的SOP操作規(guī)程，確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)、客觀、可靠！

3. 啟動(dòng)子功能研究以及miRNA靶向關(guān)系驗(yàn)證均可做！

服務(wù)周期:

1、雙熒光素酶載體構(gòu)建 5-15工作日

2、miRNA mimics合成 5-10工作日

3、細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn) 5-10工作日

4、雙熒光素酶檢測(cè) 3-5工作日

5、數(shù)據(jù)分析 3-5工作日

樣本郵寄要求：

1.復(fù)蘇細(xì)胞：不透氣T25方瓶，常溫；

2.凍存細(xì)胞：純干冰件，保證干冰充足；

3.質(zhì)粒、miRNA等-20℃寄送。

交付標(biāo)準(zhǔn)：

1.完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告一份（包括所用到試劑耗材、儀器設(shè)備、操作步驟、原始數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果）。

2.剩余的物料。

常見問題

問：細(xì)胞的運(yùn)輸方式有哪些？有什么區(qū)別？

答：公司提供兩種運(yùn)輸方式供老師選擇，1、復(fù)蘇的活細(xì)胞：采用常溫發(fā)貨的方式，收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢(shì)是省去復(fù)蘇的步驟，細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞：采用干冰運(yùn)輸，一般情況下發(fā)貨是2支凍存管，收到后放-80過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮長(zhǎng)期存儲(chǔ)，擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢(shì)是發(fā)貨快，一般一兩天即可收到，缺點(diǎn)是需要自己復(fù)蘇。

問：為什么你們的細(xì)胞和其他公司的細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣？

答：我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫(kù)的培養(yǎng)信息，如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺(tái)。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案，根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇！

問：培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復(fù)使用嗎？

答：不可以重復(fù)使用，一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出，充液的培養(yǎng)基血清比例會(huì)比正常培養(yǎng)時(shí)所用到的培養(yǎng)液低很多，通常在3-5%，以維持細(xì)胞存活，控制生長(zhǎng)速度，不可以用來做細(xì)胞培養(yǎng)使用。

問：培養(yǎng)細(xì)胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點(diǎn)是什么？

答：細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點(diǎn)點(diǎn)，一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物，懸浮細(xì)胞也會(huì)有這種現(xiàn)象，出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點(diǎn)。通常，白色的圓點(diǎn)是分散分布的，聚團(tuán)類的懸浮細(xì)胞可能會(huì)聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑，技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

問：剛買回來的細(xì)胞如何凍存留種呢？

答：一般情況下，我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種，可先凍存1-2支凍存管，凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些，便于后期復(fù)蘇。購(gòu)買原代細(xì)胞的客戶，要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制，人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右，鼠源的可以傳3代左右，對(duì)于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞，不建議凍存，收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實(shí)驗(yàn)。