shRNA 篩靶套餐
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一鍵復(fù)制產(chǎn)品信息
產(chǎn)品推薦
聯(lián)系方式
- 電話:400-1016-218
- 郵箱:355185756@qq.com
- 地址:安徽省合肥市高新區(qū)黃山路602號合肥國家大學(xué)科技園A401室
產(chǎn)品詳情
針對不同靶點設(shè)計的shRNA敲降效果往往不同,所以,在進行RNA干擾實驗之前,有必要進行有效shRNA的篩選,在3-5條shRNA中篩選1-2條干擾效率最高的shRNA ,以進行后續(xù)實驗。
若293等工具細(xì)胞中有目的基因高表達,則可直接導(dǎo)入shRNA表達載體進行篩選。而如果293等細(xì)胞中目的基因表達量低,則需要額外共轉(zhuǎn)染一個目的基因的過表達載體,人為地創(chuàng)造一個目的基因高表達環(huán)境,以便于shRNA的篩選和驗證。
實驗流程圖

我們的優(yōu)勢:
1.高環(huán)評、標(biāo)準(zhǔn)化、開放式實驗室,客戶可全程跟蹤實驗;
2.標(biāo)準(zhǔn)的SOP操作規(guī)程,確保實驗數(shù)據(jù)真實、客觀、可靠!
服務(wù)周期:
1、預(yù)實驗293 等工具細(xì)胞中目的基因表達量 5工作日
2、shRNA 表達載體構(gòu)建(默認(rèn)為三條) 10-15工作日
3、轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒大提( 100 μg) 5工作日
4、細(xì)胞培養(yǎng) 5工作日
5、細(xì)胞轉(zhuǎn)染 5工作日
6、qPCR 檢測 5工作日
7、數(shù)據(jù)分析 3-5工作日
樣本郵寄要求
1.復(fù)蘇細(xì)胞:不透氣T25方瓶,常溫;
2.凍存細(xì)胞:純干冰件,保證干冰充足;
3.質(zhì)粒、miRNA等-20℃寄送。
交付標(biāo)準(zhǔn):
1.完整實驗報告一份(包括所用到試劑耗材、儀器設(shè)備、操作步驟、原始數(shù)據(jù)和實驗分析結(jié)果)。
2.剩余的樣本和試劑。
常見問題
答:公司提供兩種運輸方式供老師選擇,1、復(fù)蘇的活細(xì)胞:采用常溫發(fā)貨的方式,收到即可觀察密度并判斷是否進行傳代操作。優(yōu)勢是省去復(fù)蘇的步驟,細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞:采用干冰運輸,一般情況下發(fā)貨是2支凍存管,收到后放-80過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲,擇機復(fù)蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快,一般一兩天即可收到,缺點是需要自己復(fù)蘇。
答:我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息,如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案,根據(jù)客戶的意愿進行選擇!
答:不可以重復(fù)使用,一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達到一定的密度后發(fā)出,充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多,通常在3-5%,以維持細(xì)胞存活,控制生長速度,不可以用來做細(xì)胞培養(yǎng)使用。
答:細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點點,一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物,懸浮細(xì)胞也會有這種現(xiàn)象,出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點。通常,白色的圓點是分散分布的,聚團類的懸浮細(xì)胞可能會聚團出現(xiàn)白色的亮斑,技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。
答:一般情況下,我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種,可先凍存1-2支凍存管,凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些,便于后期復(fù)蘇。購買原代細(xì)胞的客戶,要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制,人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右,鼠源的可以傳3代左右,對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞,不建議凍存,收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實驗。








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