MSP法：用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，所有未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變；隨后設(shè)計針對甲基化和非甲基化序列的引物進(jìn)行PCR。通過電泳檢測MSP擴(kuò)增產(chǎn)物，如果用針對處理后甲基化DNA鏈的引物能得到擴(kuò)增片段，則說明該位點存在甲基化；反之，說明被檢測的位點不存在甲基化。

BSP法：用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，則未發(fā)生甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變。隨后設(shè)計BSP引物進(jìn)行PCR，在擴(kuò)增過程中尿嘧啶全部轉(zhuǎn)化為胸腺嘧啶，最后對PCR產(chǎn)物進(jìn)行測序就可以判斷CpG位點是否發(fā)生甲基化。

實驗流程圖

我們的優(yōu)勢：

1.高環(huán)評、標(biāo)準(zhǔn)化、開放式實驗室，客戶可全程跟蹤實驗；

2.購有熱循環(huán)儀、PCR儀等先進(jìn)整套儀器設(shè)備；

3.標(biāo)準(zhǔn)的SOP操作規(guī)程，確保實驗數(shù)據(jù)真實、客觀、可靠！

4.MSP法和BSP法都可接單！

服務(wù)周期:

1、引物設(shè)計、合成與優(yōu)化  5-7工作日

2、修飾處理與PCR鑒定  5-7工作日

3、產(chǎn)物回收與測序  10-15工作日

4、圈點圖實驗報告分析  3-5工作日

樣本準(zhǔn)備要求

細(xì)胞樣本：細(xì)胞處理結(jié)束后，去除培養(yǎng)液收集細(xì)胞沉淀，細(xì)胞量≥1*10^6（離心成團(tuán)米粒大小），液氮速凍保存于-80℃干冰運輸。

組織樣本：動物冰上取材≥300mg，液氮速凍保存于-80℃冰箱，干冰運輸。

全血樣本：全血采集于肝素鈉抗凝管/凍存管中,體積≥2ml，液氮速凍保存于-80℃干冰運輸。

石蠟樣本：石蠟包埋切片≥10張，面積＞10mm*10mm，厚度5-10um，冰袋運輸。

DNA樣本：體積≥20ul,濃度100ng/ul，OD值1.8-2.0；DNA總量≥2ug,-20℃保存，冰袋運輸。

交付標(biāo)準(zhǔn)：

1.完整實驗報告一份（包括所用到試劑耗材、儀器設(shè)備、操作步驟、原始數(shù)據(jù)和實驗分析結(jié)果）。

2.剩余的樣本和試劑