一、細(xì)胞簡(jiǎn)介

細(xì)胞簡(jiǎn)介

該細(xì)胞來(lái)源于小鼠的正常心臟組織。

心臟是脊椎動(dòng)物身體中最重要的一個(gè)器官，主要功能是提供壓力，把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng)，向器官、組織提供充足的血流量，以供應(yīng)氧和各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無(wú)機(jī)鹽、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。微血管內(nèi)皮細(xì)胞呈單層覆蓋于微血管表面，構(gòu)成血管內(nèi)外物質(zhì)交換的一種重要屏障，是循環(huán)血流動(dòng)力和血液中危險(xiǎn)因素的主要靶點(diǎn)。

細(xì)胞名稱

小鼠原代心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞

細(xì)胞別稱

Mouse primary cardiac microvascular endothelial cells

細(xì)胞貨號(hào)

Delf-11053

來(lái)源

小鼠；正常心臟

細(xì)胞形態(tài)

多角形細(xì)胞

生長(zhǎng)特性

貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)條件

推薦使用DELF原代內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)該細(xì)胞。

名稱

體積

濃度

保存條件

原代內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

500ml

1×

4℃、避光

原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清（FBS）

25mL

終濃度5%

-20℃、避光

雙抗（青霉素/鏈霉素，P/S）

5ml

100×

-20℃、避光

培養(yǎng)環(huán)境

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

二、細(xì)胞復(fù)蘇方法

復(fù)蘇步驟

1、將凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍；
2、加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻；
3、在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞；
4、將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)；

三、細(xì)胞傳代方法

傳代比例

1:2（具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定）

傳代方法

1、盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；
2、用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次，吸走潤(rùn)洗的PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化（1到2分鐘，難消化的細(xì)胞適當(dāng)增加時(shí)間）；
5、消化到細(xì)胞大部分變圓并脫落，輕敲培養(yǎng)瓶后加入3-4ml完培終止消化；
6、混勻細(xì)胞吸出，1000rpm離心3-5min，棄上清；補(bǔ)加1-2ml完培吹勻；
7、按1:2分配到新的培養(yǎng)瓶中，添加6-8ml完培保持細(xì)胞生長(zhǎng)；

注意事項(xiàng)

不同品牌胰酶消化時(shí)間差別較大，可根據(jù)細(xì)胞形態(tài)判斷消化進(jìn)程

五、注意事項(xiàng)

注意事項(xiàng)

1、所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2、建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意：凍存管浸沒(méi)在液氮中會(huì)泄漏，并會(huì)慢慢充滿液氮。解凍時(shí)，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。

3、本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。