一、細胞簡介

細胞簡介

該細胞來源于小鼠的正常胰腺組織。

胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氫鈉、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。

內(nèi)分泌腺由大小不同的細胞團-胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：胰島能分泌胰島素與胰高血糖素等激素。人類的胰島細胞按其染色和形態(tài)學(xué)特點，主要分為α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞約占胰島細胞的20%，分泌胰高血糖素；β細胞占胰島細胞的60%-70%，分泌胰島素；γ細胞占胰島細胞的10%，分泌“生長抑素”；PP細胞數(shù)量很少，分泌胰多肽。

細胞名稱

小鼠原代胰島細胞

細胞別稱

Mouse primary pancreatic islet cells

細胞貨號

Delf-10907

來源

小鼠；正常胰腺

細胞形態(tài)

島狀成團生長

生長特性

貼壁生長

培養(yǎng)條件

推薦使用DELF原代上皮細胞專用培養(yǎng)基來培養(yǎng)該細胞。

名稱

體積

濃度

保存條件

原代上皮細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

500mL

1×

4℃、避光

原代上皮細胞培養(yǎng)添加劑

5mL

100×

-20℃、避光

胎牛血清（FBS）

10mL

終濃度2%

-20℃、避光

雙抗（青霉素/鏈霉素，P/S）

5ml

100×

-20℃、避光

培養(yǎng)環(huán)境

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

二、細胞復(fù)蘇方法

復(fù)蘇步驟

1、將凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍；
2、加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻；
3、在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞；
4、將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)；

三、細胞傳代方法

傳代比例

1:2（具體情況視細胞生長速度及密度決定）

傳代方法

1、盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；
2、用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次，吸走潤洗的PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化（1到2分鐘，難消化的細胞適當增加時間）；
5、消化到細胞大部分變圓并脫落，輕敲培養(yǎng)瓶后加入3-4ml完培終止消化；
6、混勻細胞吸出，1000rpm離心3-5min，棄上清；補加1-2ml完培吹勻；
7、按1:2分配到新的培養(yǎng)瓶中，添加6-8ml完培保持細胞生長；

注意事項

不同品牌胰酶消化時間差別較大，可根據(jù)細胞形態(tài)判斷消化進程

五、注意事項

注意事項

1、所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2、建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。

3、本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。