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尼氏染色

尼氏染色，服務(wù)介紹：尼氏染色(Nissl染色)，F(xiàn)rannaNissl(1860-1919)1892年創(chuàng)立了Nissl染色法，以發(fā)現(xiàn)Nissl小體和Nissl變性而聞名它能夠清楚地顯示軟骨形態(tài)潮線等結(jié)構(gòu)，觀察軟骨組織是否有損傷。能將組織內(nèi)的肥大細(xì)胞清晰地顯示出來(lái)，便于觀察肥大細(xì)胞的數(shù)量分布變化情況及觀察肥大細(xì)胞是否有脫顆粒現(xiàn)象。尼氏體的化學(xué)成分是一種含有鐵質(zhì)的核酸蛋白，是神經(jīng)元內(nèi)合成蛋白質(zhì)的主要部位，當(dāng)神經(jīng)......

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服務(wù)介紹：

尼氏染色(Nissl染色)，F(xiàn)ranna Nissl (1860-1919) 1892年創(chuàng)立了Nissl染色法，以發(fā)現(xiàn)Nissl小體和Nissl變性而聞名它能夠清楚地顯示軟骨形態(tài)潮線等結(jié)構(gòu)，觀察軟骨組織是否有損傷。

能將組織內(nèi)的肥大細(xì)胞清晰地顯示出來(lái)，便于觀察肥大細(xì)胞的數(shù)量分布變化情況及觀察肥大細(xì)胞是否有脫顆粒現(xiàn)象。尼氏體的化學(xué)成分是一種含有鐵質(zhì)的核酸蛋白，是神經(jīng)元內(nèi)合成蛋白質(zhì)的主要部位，當(dāng)神經(jīng)元受刺激后，胞體內(nèi)的尼氏體即顯著減少甚至消失。

尼氏體的存在和消失反應(yīng)神經(jīng)細(xì)胞是否受損害。當(dāng)神經(jīng)元受到嚴(yán)重?fù)p害時(shí)，尼氏體就溶解而消失，最后神經(jīng)元壞死

實(shí)驗(yàn)流程：

脫蠟至水-尼氏染色-脫水封片-顯微鏡鏡檢

結(jié)果判讀：

神經(jīng)元內(nèi)的尼氏小體呈深藍(lán)色顆粒，細(xì)胞核呈淡藍(lán)色，背景淡藍(lán)色。

送樣運(yùn)輸要求：

1.樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h以上，常溫運(yùn)輸送樣。切勿固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，切勿冷凍結(jié)冰。

2.石蠟切片常溫運(yùn)輸，冰凍切片-20℃運(yùn)輸。

常見(jiàn)問(wèn)題

問(wèn)：細(xì)胞的運(yùn)輸方式有哪些？有什么區(qū)別？

答：公司提供兩種運(yùn)輸方式供老師選擇，1、復(fù)蘇的活細(xì)胞：采用常溫發(fā)貨的方式，收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢(shì)是省去復(fù)蘇的步驟，細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞：采用干冰運(yùn)輸，一般情況下發(fā)貨是2支凍存管，收到后放-80過(guò)夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮長(zhǎng)期存儲(chǔ)，擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢(shì)是發(fā)貨快，一般一兩天即可收到，缺點(diǎn)是需要自己復(fù)蘇。

問(wèn)：為什么你們的細(xì)胞和其他公司的細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣？

答：我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫(kù)的培養(yǎng)信息，如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺(tái)。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案，根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇！

問(wèn)：培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復(fù)使用嗎？

答：不可以重復(fù)使用，一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出，充液的培養(yǎng)基血清比例會(huì)比正常培養(yǎng)時(shí)所用到的培養(yǎng)液低很多，通常在3-5%，以維持細(xì)胞存活，控制生長(zhǎng)速度，不可以用來(lái)做細(xì)胞培養(yǎng)使用。

問(wèn)：培養(yǎng)細(xì)胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點(diǎn)是什么？

答：細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點(diǎn)點(diǎn)，一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物，懸浮細(xì)胞也會(huì)有這種現(xiàn)象，出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點(diǎn)。通常，白色的圓點(diǎn)是分散分布的，聚團(tuán)類(lèi)的懸浮細(xì)胞可能會(huì)聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑，技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

問(wèn)：剛買(mǎi)回來(lái)的細(xì)胞如何凍存留種呢？

答：一般情況下，我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種，可先凍存1-2支凍存管，凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些，便于后期復(fù)蘇。購(gòu)買(mǎi)原代細(xì)胞的客戶，要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制，人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右，鼠源的可以傳3代左右，對(duì)于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞，不建議凍存，收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實(shí)驗(yàn)。