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未脫鈣骨TRAP染色

未脫鈣骨TRAP染色，服務(wù)介紹：抗酒石酸酸性磷酸酶染色,又稱Trap染色，是用于檢測骨、骨細胞中破骨細胞的染色，使破骨細胞呈紅色，細胞核淺藍色，用以顯示破骨細胞的分布及數(shù)量變化。實驗流程：硬組織切片：切片脫塑-組織處理液處理-染液配制-Trap染色-蘇木素淺染核-脫水封片-顯微鏡鏡檢送樣運輸要求：1.骨組織樣本放置于20倍樣本體積的固定液中常溫固定24h到48h，4℃保存運輸送樣。切勿固定時間過長（不宜超過2周），切勿......

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安徽省合肥市高新區(qū)黃山路602號合肥國家大學(xué)科技園A401室

產(chǎn)品詳情

服務(wù)介紹：

抗酒石酸酸性磷酸酶染色,又稱Trap染色，是用于檢測骨、骨細胞中破骨細胞的染色，使破骨細胞呈紅色，細胞核淺藍色，用以顯示破骨細胞的分布及數(shù)量變化。

實驗流程：

硬組織切片：切片脫塑-組織處理液處理-染液配制-Trap染色-蘇木素淺染核-脫水封片-顯微鏡鏡檢

送樣運輸要求：

1.骨組織樣本放置于20倍樣本體積的固定液中常溫固定24h到48h，4℃保存運輸送樣。切勿固定時間過長（不宜超過2周），切勿冷凍結(jié)冰。

2.硬組織切片常溫運輸。

注意事項：

1、目前該服務(wù)針對硬組織切片，切磨片暫時未開展。

2、硬組織切片的制片方式較多，不同的制片方式可能也會影響染色結(jié)果，目前公司的制片方法是梯度酒精脫水，MMA樹脂包埋，硬組織切片機切片，切片厚度8-10um。

3、TRAP染色主要是通過組織本身酶的活性來達到染色的目的，但是固定不及時，固定時間太長，或者用酸性固定液固定都可能會影響酶的活性。推薦固定條件：動物處死后10分鐘內(nèi)剝皮去肉，20倍體積中性多聚甲醛固定液常溫固定24到48小時，可以在搖床上緩慢搖動，加速固定液滲透。固定完成后可以4℃保存運輸送檢，不宜在固定液中保存超過2周時間。

常見問題

問：細胞的運輸方式有哪些？有什么區(qū)別？

答：公司提供兩種運輸方式供老師選擇，1、復(fù)蘇的活細胞：采用常溫發(fā)貨的方式，收到即可觀察密度并判斷是否進行傳代操作。優(yōu)勢是省去復(fù)蘇的步驟，細胞成活率較高。2、凍存的細胞：采用干冰運輸，一般情況下發(fā)貨是2支凍存管，收到后放-80過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲，擇機復(fù)蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快，一般一兩天即可收到，缺點是需要自己復(fù)蘇。

問：為什么你們的細胞和其他公司的細胞培養(yǎng)條件不一樣？

答：我公司提供的細胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息，如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案，根據(jù)客戶的意愿進行選擇！

問：培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復(fù)使用嗎？

答：不可以重復(fù)使用，一般從我公司發(fā)出的細胞都需要達到一定的密度后發(fā)出，充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多，通常在3-5%，以維持細胞存活，控制生長速度，不可以用來做細胞培養(yǎng)使用。

問：培養(yǎng)細胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點是什么？

答：細胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點點，一般情況下是為貼壁的細胞或脫落的細胞死亡后的產(chǎn)物，懸浮細胞也會有這種現(xiàn)象，出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點。通常，白色的圓點是分散分布的，聚團類的懸浮細胞可能會聚團出現(xiàn)白色的亮斑，技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

問：剛買回來的細胞如何凍存留種呢？

答：一般情況下，我公司建議客戶收到細胞后傳1-2代后即可安排凍存留種，可先凍存1-2支凍存管，凍存的細胞數(shù)量多一些，便于后期復(fù)蘇。購買原代細胞的客戶，要充分考慮該細胞的傳代次數(shù)限制，人源原代細胞大概可以傳7代左右，鼠源的可以傳3代左右，對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細胞，不建議凍存，收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實驗。