視網(wǎng)膜血管網(wǎng)鋪片PAS染色
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一鍵復(fù)制產(chǎn)品信息
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產(chǎn)品詳情
服務(wù)介紹:
視網(wǎng)膜血管網(wǎng)鋪片是研究糖尿病視網(wǎng)膜病變 (diabetic retinopathy,DR)的金標(biāo)準(zhǔn)之一,可以定性、定量地評估視網(wǎng)膜血管形態(tài),包括血管走行、面積分布和管壁細(xì)胞結(jié)構(gòu),更直觀地了解DR微血管的病變情況。
實(shí)驗(yàn)原理:
單獨(dú)剝?nèi)⊙矍蛞暰W(wǎng)膜,用胰酶消化去除視網(wǎng)膜內(nèi)細(xì)胞只保留血管網(wǎng),將血管網(wǎng)均勻地鋪在載玻片上進(jìn)行PAS染色。PAS染色又稱過碘酸雪夫染色。一般用來顯示糖原和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合呈現(xiàn)紫紅色,復(fù)染蘇木素,細(xì)胞核呈藍(lán)色。毛細(xì)血管基底膜含有大量糖類物質(zhì),經(jīng)PAS染色后呈現(xiàn)紫紅色,進(jìn)而將血管網(wǎng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)染出來。
結(jié)果判讀:
視網(wǎng)膜毛細(xì)血管呈紫紅色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。閉鎖毛細(xì)血管細(xì)胞核消失,且管腔萎縮變細(xì)呈細(xì)線狀。
樣本的保存運(yùn)輸條件及注意事項(xiàng):
1)整顆眼球4%PFA固定24h以上,常溫保存運(yùn)輸。
2)固定樣本一個(gè)月內(nèi)送樣檢測,固定時(shí)間過長,制片效果不佳。
常見問題
答:公司提供兩種運(yùn)輸方式供老師選擇,1、復(fù)蘇的活細(xì)胞:采用常溫發(fā)貨的方式,收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢是省去復(fù)蘇的步驟,細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞:采用干冰運(yùn)輸,一般情況下發(fā)貨是2支凍存管,收到后放-80過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲(chǔ),擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快,一般一兩天即可收到,缺點(diǎn)是需要自己復(fù)蘇。
答:我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息,如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺(tái)。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案,根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇!
答:不可以重復(fù)使用,一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出,充液的培養(yǎng)基血清比例會(huì)比正常培養(yǎng)時(shí)所用到的培養(yǎng)液低很多,通常在3-5%,以維持細(xì)胞存活,控制生長速度,不可以用來做細(xì)胞培養(yǎng)使用。
答:細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點(diǎn)點(diǎn),一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物,懸浮細(xì)胞也會(huì)有這種現(xiàn)象,出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點(diǎn)。通常,白色的圓點(diǎn)是分散分布的,聚團(tuán)類的懸浮細(xì)胞可能會(huì)聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑,技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。
答:一般情況下,我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種,可先凍存1-2支凍存管,凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些,便于后期復(fù)蘇。購買原代細(xì)胞的客戶,要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制,人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右,鼠源的可以傳3代左右,對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞,不建議凍存,收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實(shí)驗(yàn)。













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