項(xiàng)目介紹

掃描電鏡(SEM)利用樣品表面材料的物質(zhì)性能進(jìn)行微觀成像，可得到有關(guān)物質(zhì)微觀形貌的信息，具有較高的放大倍數(shù)，成像富有立體感，可以清楚的觀察到各種樣本凹凸不平表面的細(xì)微結(jié)構(gòu)或者內(nèi)部某個(gè)截面的微觀形貌特征。掃描電鏡的主要原理是利用電子和物質(zhì)的相互作用從而獲取樣本微觀形貌的信息，目前廣泛用于植物學(xué)、動(dòng)物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、微生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料科學(xué)、冶金等諸多學(xué)科中物體組織表面或斷面精細(xì)結(jié)構(gòu)的研究。常用于觀察細(xì)胞表面、植物木質(zhì)部、葉面、動(dòng)物毛纖維、蟲(chóng)類(lèi)、生物醫(yī)學(xué)材料、晶體材料、細(xì)菌、真菌等。不含水的樣本可以不用固定。

電鏡平臺(tái)主要設(shè)備：臨界點(diǎn)干燥儀Quorum K850，離子濺射儀HITACHI MC1000，掃描電鏡HITACHI Regulus 8100 （高分辨冷場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡）。

掃描電鏡HITACHI Regulus 8100主要技術(shù)指標(biāo)：

二次電子分辨率：1.0nm(加速電壓15kV、WD=4mm) 1.3nm(加速電壓1kV、WD=1.5mm)

放大倍數(shù)：30～1000,000

加速電壓：0.1-30KV

掃描電鏡廣泛用于植物學(xué)、動(dòng)物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、微生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、材料科學(xué)、冶金等諸多學(xué)科中物體組織表面或斷面的精細(xì)結(jié)構(gòu)研究。常見(jiàn)可觀察細(xì)胞表面、植物木質(zhì)部、葉面、動(dòng)物毛纖維、病毒顆粒、外泌體、治病蟲(chóng)害、生物醫(yī)學(xué)材料、晶體材料、細(xì)菌、真菌等。

實(shí)驗(yàn)流程：

脫水-干燥-噴金-拍照

送樣運(yùn)輸要求

掃描電鏡樣本準(zhǔn)備方法及要求

1、動(dòng)植物組織樣本

①1-3min內(nèi)取樣，組織塊不超過(guò)3mm²，用PBS輕輕漂洗將樣本表面的血污，毛發(fā)等去掉，將需要掃描的面做好標(biāo)記(如在對(duì)面進(jìn)行剪角處理)。

②取材時(shí)一定注意避免鑷子擠壓等機(jī)械損傷，刀片要鋒利避免挫傷組織。尤其是注意保護(hù)掃描面。

③組織取下后立即投入電鏡固定液內(nèi)室溫固定2h，再轉(zhuǎn)移至4°保存，4°冰袋運(yùn)輸，在保存和運(yùn)輸過(guò)程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。

④植物樣本放入固定液后需抽氣沉底。

2、細(xì)胞樣本

貼壁細(xì)胞：細(xì)胞必須貼壁于蓋玻片上制成爬片，細(xì)胞棄培養(yǎng)基，用PBS輕輕漂洗后，棄PBS加電鏡固定液室溫固定30min，再轉(zhuǎn)移至4°保存，4°冰袋運(yùn)輸，在保存和運(yùn)輸過(guò)程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。

懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞要肉眼可見(jiàn)細(xì)胞沉淀米粒大小，棄培養(yǎng)基后用PBS輕輕漂洗后，棄PBS加電鏡固定液，細(xì)胞必須吹散懸浮于固定液內(nèi)，室溫固定30min，再轉(zhuǎn)移至4°保存，4°冰袋運(yùn)輸，在保存和運(yùn)輸過(guò)程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。

3、細(xì)菌樣本

固體培養(yǎng)基的細(xì)菌：細(xì)菌必須貼壁于蓋玻片上制成爬片，用蓋玻片輕輕覆蓋在菌落上，在培養(yǎng)箱培養(yǎng)一晚上，第二天輕輕揭下來(lái)，放入固定液中室溫固定30min，再轉(zhuǎn)移至4°保存， 4°冰袋運(yùn)輸，在保存和運(yùn)輸過(guò)程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。

懸浮細(xì)菌孢子等：離心收集細(xì)菌要肉眼可見(jiàn)細(xì)菌沉淀芝麻至綠豆大小，棄培養(yǎng)基后用PBS輕輕漂洗后，棄PBS加電鏡固定液，必須吹散懸浮于固定液內(nèi)，室溫固定30min，再轉(zhuǎn)移至4°保存，4°冰袋運(yùn)輸，在保存和運(yùn)輸過(guò)程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。

4、其他如粉末狀材料

直接準(zhǔn)備干燥的粉劑。帶有磁性的金屬材料不能做掃描電鏡。