蛋白免疫印跡（Western Blot）是將組織或細(xì)胞總蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離后轉(zhuǎn)移到NC膜或PVDF膜上，然后利用特異性抗體檢測(cè)某特定抗原的一種蛋白檢測(cè)技術(shù)，已廣泛應(yīng)用于蛋白表達(dá)檢測(cè)、抗體活性檢測(cè)及疾病早期診斷等多個(gè)領(lǐng)域。

Western blot 流程圖

我們的優(yōu)勢(shì)：

1、高環(huán)評(píng)、標(biāo)準(zhǔn)化、開(kāi)放式實(shí)驗(yàn)室，客戶(hù)可全程跟蹤實(shí)驗(yàn)；

2、購(gòu)有純水儀、化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)等整套新進(jìn)儀器設(shè)備；

3、標(biāo)準(zhǔn)的SOP操作規(guī)程，確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)、客觀、可靠！

4、代理多廠家品牌抗體，種類(lèi)齊全！

5、成熟蛋白提取技術(shù)，可提取總蛋白、核/膜蛋白、線粒體蛋白等多種特殊蛋白

6、檢測(cè)蛋白大小范圍：4-200kDa左右

服務(wù)周期

1、總蛋白提取  1-3工作日

2、總蛋白提取  1-3工作日

3、線粒體蛋白提取  1-3工作日

4、抗體最佳濃度摸索  5-7工作日

5、總蛋白WB跑膠  5-7工作日

6、磷酸化蛋白WB跑膠  5-7工作日

7、乙酰化蛋白WB跑膠  5-7工作日

8、灰度值等分析報(bào)告  5-7工作日

樣本準(zhǔn)備要求：

組織樣本：組織1cm×1cm×1cm大小，冰上取材，用生理鹽水洗凈去除血漬和污物，并剔除非研究所需的組織，放入已標(biāo)記的凍存管中，液氮速凍后，轉(zhuǎn)運(yùn)至-80℃冰箱保存，干冰運(yùn)輸。

細(xì)胞樣本：培養(yǎng)好的細(xì)胞用細(xì)胞刮刮下或胰酶消化，離心收集細(xì)胞團(tuán)，細(xì)胞團(tuán)要求 1×107 如米粒或黃豆大小，液氮速凍后放入-80 ℃冰箱中保存，干冰運(yùn)輸。

全血樣本:肝素鈉（綠頭）或EDTA（紫頭）抗凝管采集全血1ml，上下顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻，1h之內(nèi)進(jìn)行白細(xì)胞提取，細(xì)胞團(tuán)要求 1×107 如米粒或黃豆大小，液氮速凍后放入-80 ℃冰箱中保存，干冰運(yùn)輸。

蛋白提取液：總蛋白濃度（細(xì)胞不低于3μg/μl，組織不低于5μg/μl）。

注意：提取后的蛋白建議經(jīng)過(guò)濃度測(cè)定，再進(jìn)行變性，變性時(shí)先加入Sample buffer，再95℃ 水浴10min，緩慢恢復(fù)至室溫后離心。變性的蛋白可直接超低溫保存（-80℃冰箱保存或干冰運(yùn)輸）。

交付標(biāo)準(zhǔn)：

1.完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告一份（包括所用到試劑耗材、儀器設(shè)備、操作步驟、原始數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果）。

2.剩余的樣本和試劑