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小鼠BDL誘導(dǎo)肝纖維化模型

小鼠BDL誘導(dǎo)肝纖維化模型，服務(wù)介紹：膽管結(jié)扎(BDL)導(dǎo)致膽汁淤積，從而引起肝臟細(xì)胞凋亡和壞死以及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。實(shí)驗(yàn)流程：1、動(dòng)物麻醉：1%戊巴比妥鈉腹腔注射(按75mg/kg體重)，待動(dòng)物麻醉成功后，備皮，范圍：上至胸骨柄，下至?xí)帲笥曳謩e至腋前線或腋中線。2、術(shù)前消毒：將動(dòng)物固定于操作臺(tái)上，用無(wú)菌棉球蘸取75%酒精，輕柔地消毒手術(shù)區(qū)域3次。3、在腹正中線、會(huì)陰上約1cm處，以眼科剪逐層剪開(kāi)皮膚及肌肉等組織，向上開(kāi)口至......

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產(chǎn)品詳情

服務(wù)介紹：

膽管結(jié)扎(BDL)導(dǎo)致膽汁淤積，從而引起肝臟細(xì)胞凋亡和壞死以及炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。

實(shí)驗(yàn)流程：

1、動(dòng)物麻醉：1%戊巴比妥鈉腹腔注射(按75mg/kg體重)，待動(dòng)物麻醉成功后，備皮，范圍：上至胸骨柄，下至?xí)帲笥曳謩e至腋前線或腋中線。

2、術(shù)前消毒：將動(dòng)物固定于操作臺(tái)上，用無(wú)菌棉球蘸取75%酒精，輕柔地消毒手術(shù)區(qū)域3次。

3、在腹正中線、會(huì)陰上約1cm處，以眼科剪逐層剪開(kāi)皮膚及肌肉等組織，向上開(kāi)口至劍突上約0.5~1cm，以能暴露肝臟組織為宜。

4、取2支無(wú)菌棉簽，以生理鹽水稍潤(rùn)濕后探入腹腔內(nèi)，將肝葉、胃及部分腸管輕輕向右撥開(kāi)，可觀察到自肝門部位發(fā)出的與門脈伴行的透明膽管，繼續(xù)向下可見(jiàn)膽管常附著于一小段腸管之上。

5、以眼科鑷輕柔鈍性游離一小段膽管(約0.5cm)，埋置1條6-0手術(shù)縫合線并分別打手術(shù)結(jié)。線頭留取長(zhǎng)度不宜過(guò)短，約0.5cm即可。一般此時(shí)即可觀察到膽管較結(jié)扎前輕微增粗;

6、確認(rèn)腹腔內(nèi)無(wú)臟器損傷或出血后，以棉簽輕輕復(fù)位肝葉、胃及腸管，6-0手術(shù)縫線逐層關(guān)腹，留取線頭長(zhǎng)度以0.3cm為宜。皮膚縫合完畢后以酒精棉球消毒切口1-2次，注意擦凈切口處血漬。

常見(jiàn)問(wèn)題

問(wèn)：細(xì)胞的運(yùn)輸方式有哪些？有什么區(qū)別？

答：公司提供兩種運(yùn)輸方式供老師選擇，1、復(fù)蘇的活細(xì)胞：采用常溫發(fā)貨的方式，收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢(shì)是省去復(fù)蘇的步驟，細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞：采用干冰運(yùn)輸，一般情況下發(fā)貨是2支凍存管，收到后放-80過(guò)夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮長(zhǎng)期存儲(chǔ)，擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢(shì)是發(fā)貨快，一般一兩天即可收到，缺點(diǎn)是需要自己復(fù)蘇。

問(wèn)：為什么你們的細(xì)胞和其他公司的細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣？

答：我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫(kù)的培養(yǎng)信息，如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺(tái)。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案，根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇！

問(wèn)：培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復(fù)使用嗎？

答：不可以重復(fù)使用，一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出，充液的培養(yǎng)基血清比例會(huì)比正常培養(yǎng)時(shí)所用到的培養(yǎng)液低很多，通常在3-5%，以維持細(xì)胞存活，控制生長(zhǎng)速度，不可以用來(lái)做細(xì)胞培養(yǎng)使用。

問(wèn)：培養(yǎng)細(xì)胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點(diǎn)是什么？

答：細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點(diǎn)點(diǎn)，一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物，懸浮細(xì)胞也會(huì)有這種現(xiàn)象，出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點(diǎn)。通常，白色的圓點(diǎn)是分散分布的，聚團(tuán)類的懸浮細(xì)胞可能會(huì)聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑，技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

問(wèn)：剛買回來(lái)的細(xì)胞如何凍存留種呢？

答：一般情況下，我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種，可先凍存1-2支凍存管，凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些，便于后期復(fù)蘇。購(gòu)買原代細(xì)胞的客戶，要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制，人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右，鼠源的可以傳3代左右，對(duì)于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞，不建議凍存，收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實(shí)驗(yàn)。