一、細(xì)胞簡介

細(xì)胞簡介

alpha TC1 clone 6是1988年從患有腺瘤的小鼠胰腺中分離出來的α細(xì)胞系。它是從表達(dá)SV40大T抗原癌基因的轉(zhuǎn)基因小鼠在大鼠胰高血糖素前原啟動子控制下產(chǎn)生的腺瘤中克隆出來的。alpha TC1 clone 6是一株胰腺Alpha細(xì)胞株。 它從alpha TC1細(xì)胞株克隆而來，而alpha TC1細(xì)胞株是從轉(zhuǎn)染了大鼠前高血糖素原啟動子控制下的SV40大T抗原抗癌基因的轉(zhuǎn)基因小鼠中產(chǎn)生的腺癌中得到的。 其親本細(xì)胞株是低分化的，既產(chǎn)生高血糖素又產(chǎn)生胰島素。 兩個克隆細(xì)胞株，alpha TC1 clone 6和alpha TC1 clone 9 分化程度較高并且只產(chǎn)生高血糖素。 Alpha TC1 clone 6表現(xiàn)的分化程度最高，表達(dá)的高血糖素水平也最高。 .The alpha TC1 clone 6對研究胰島的許多生物學(xué)特性包括高血糖素的生物合成及細(xì)胞分裂素類敏感性都很有用。

細(xì)胞名稱

alpha TC1 clone 6 小鼠胰腺細(xì)胞

細(xì)胞別稱

alpha TC1 clone 6; alphaTC clone 6; alpha-TC1.6; alphaTC1.6; alpha-TC1-6; alpha TC1-6; alpha TC1.6; aTC1 Clone 6; aTC1-6

細(xì)胞貨號

Delf-27088

來源

小鼠；胰腺

細(xì)胞形態(tài)

上皮樣

生長特性

貼壁、松散連接的簇群和懸浮的單細(xì)胞

培養(yǎng)條件

MEM含NEAA培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清10%；雙抗1%。請注意細(xì)胞消化需用細(xì)胞解離緩沖液

培養(yǎng)環(huán)境

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

二、細(xì)胞復(fù)蘇方法

復(fù)蘇步驟

1、將凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍；
2、加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻；
3、在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞；
4、將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)；

三、細(xì)胞傳代方法（輕微貼壁）

傳代比例

1:2（具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定）

傳代方法

1、收集：將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細(xì)胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。由于細(xì)胞貼壁不牢PBS潤洗后細(xì)胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。

2、加入細(xì)胞解離緩沖液于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培養(yǎng)箱中消化2-3分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。

3、將收集到的懸浮細(xì)胞、pbs清洗液中的細(xì)胞和消化下來的貼壁細(xì)胞以1000rpml離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

注意事項

無需消化，輕拍培養(yǎng)瓶細(xì)胞即可脫落

四、細(xì)胞凍存方法

凍存液配方

凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配（推薦使用DELF無血清非程序細(xì)胞凍存液Delf-16090進(jìn)行凍存細(xì)胞，快速，便捷）。

凍存規(guī)格

按每1ml凍存液含1×10⁶~1×10⁷個活細(xì)胞/ml分配到一個凍存管中將細(xì)胞分配到凍存管中，標(biāo)注好名稱、代數(shù)、日期等信息。

凍存方法

1、消化并離心收集細(xì)胞，計數(shù)，推薦凍存密度為1×10⁶~1×10⁷個活細(xì)胞/ml；
2、將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管；
3、將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室，加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;

五、注意事項

注意事項

1、所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2、建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。

3、本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。