一、細(xì)胞簡(jiǎn)介

細(xì)胞簡(jiǎn)介

闌尾位于小腸和大腸之間，是一條末端為“死胡同”的狹窄管，它遠(yuǎn)離糞便流，這使得其具有保護(hù)腸道微生物的理想位置和結(jié)構(gòu)，對(duì)死者器官結(jié)腸中生物膜的檢查表明，闌尾具有最高的微生物密度且種類多樣。鑒于闌尾的特殊位置及豐富的微生物含量，人們認(rèn)為闌尾可以作為腸道菌群的“安全屋”，為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供支持。Cajal間質(zhì)細(xì)胞以網(wǎng)絡(luò)狀分布在消化道腸神經(jīng)系統(tǒng)末梢與平滑肌細(xì)胞之間的一類特殊細(xì)胞。胃腸道運(yùn)動(dòng)功能的產(chǎn)生和維持是Cajal間質(zhì)細(xì)胞、腸神經(jīng)系統(tǒng)以及平滑肌細(xì)胞三者協(xié)同作用的結(jié)果。

細(xì)胞名稱

兔原代闌尾Cajal細(xì)胞

細(xì)胞別稱

Rabbit primary appendix Cajal cells

細(xì)胞貨號(hào)

Delf-27143

來(lái)源

兔，闌尾組織

細(xì)胞形態(tài)

梭形細(xì)胞，不規(guī)則

生長(zhǎng)特性

貼壁培養(yǎng)

鑒定報(bào)告

提供免疫熒光鑒定(c-kit免疫熒光染色為陽(yáng)性)

培養(yǎng)條件

推薦使用兔原代闌尾Cajal細(xì)胞專用培養(yǎng)基（貨號(hào)：Delf-28882）來(lái)培養(yǎng)該細(xì)胞。

名稱

體積

濃度

保存條件

兔原代闌尾Cajal細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

440mL

1×

4℃、避光

兔原代闌尾Cajal細(xì)胞培養(yǎng)添加劑

5mL

100×

-20℃、避光

特級(jí)胎牛血清

50ml

終濃度10%

-20℃、避光

P/s雙抗

5mL

100×

-20℃、避光

培養(yǎng)環(huán)境

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

二、細(xì)胞復(fù)蘇方法

復(fù)蘇步驟

1、將凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍；
2、加入到含4-6mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基（含10%FBS）的離心管中混合均勻；
3、在1000RPM條件下離心5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞；
4、將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)；

三、細(xì)胞傳代方法

傳代比例

1:2（具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定）

傳代方法

1、盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；
2、用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次，吸走潤(rùn)洗的PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化（1到2分鐘，難消化的細(xì)胞適當(dāng)增加時(shí)間）；
5、消化到細(xì)胞大部分變圓并脫落，輕敲培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的基礎(chǔ)培養(yǎng)基終止消化；
6、混勻細(xì)胞吸出，1000rpm離心5min，棄上清；補(bǔ)加1-2ml完培吹勻；
7、按1:2分配到新的培養(yǎng)瓶中，添加6-8ml完培保持細(xì)胞生長(zhǎng)；

注意事項(xiàng)

不同品牌胰酶消化時(shí)間差別較大，可根據(jù)細(xì)胞形態(tài)判斷消化進(jìn)程

四、注意事項(xiàng)

注意事項(xiàng)

1、所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2、建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會(huì)泄漏，并會(huì)慢慢充滿液氮。解凍時(shí)，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。

3、本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。

細(xì)胞培養(yǎng)清除試劑