一、細胞簡介

細胞簡介

Sarcoma 180 細胞又名（S-180細胞）是從患有肉瘤的老鼠身上分離出的動物細胞系。它可以用于癌癥研究。檢測結(jié)果為陰性，未發(fā)現(xiàn)缺損病毒（鼠痘）。

細胞名稱

Sarcoma 180 小鼠腹水瘤細胞

細胞別稱

Sarcoma 180

細胞貨號

Delf-28753

來源

小鼠  腹水瘤

細胞形態(tài)

淋巴母細胞

生長特性

懸浮生長，部分細胞貼壁生長

培養(yǎng)條件

DMEM培養(yǎng)基（貨號：Delf-16563）；優(yōu)質(zhì)胎牛血清10%（貨號：Delf-11405）；

雙抗1%（貨號：Delf-15487）。

培養(yǎng)環(huán)境

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

二、細胞復(fù)蘇方法

復(fù)蘇步驟

1、將凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍；
2、加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻；
3、在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞；
4、將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)；

三、細胞傳代方法

傳代比例

1:2（具體情況視細胞生長速度及密度決定）

傳代方法

1、當(dāng)細胞量達到8-10×10⁵cell/ml 時，可進行傳代；

2、在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的細胞懸液至離心管中；瓶底可能有部分貼壁細胞，可消化后收集。

3、1000rpm 離心 5min，離心完成后，棄上清；

4、準備兩個新的T-25 培養(yǎng)瓶。向細胞沉淀加入完全培養(yǎng)基重懸，調(diào)整細胞密度為2-4×10⁵cell/ml，均勻鋪于2個新的培養(yǎng)瓶中，每瓶約6-8ml；

5、水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO₂ 培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

注意事項

注意收集懸浮的細胞以及可能貼在瓶底的細胞

四、細胞凍存方法

凍存液配方

推薦使用DELF無血清非程序細胞凍存液Delf-16090進行凍存細胞，快速，便捷。

凍存規(guī)格

建議每瓶T25瓶凍存1支。

凍存方法

1、待細胞生長狀態(tài)良好時，即可進行細胞凍存；

2、收集細胞懸液，計數(shù)；

3、1000rpm 離心 5min，離心完成后，棄上清；

4、加入細胞凍存液重懸細胞沉淀，調(diào)整細胞密度為2×10⁶cell/ml，輕輕混勻后，將細胞懸液加入凍存管，1ml/支。

5、將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

6、次日取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存；

五、注意事項

注意事項

1、所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2、建議在復(fù)蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚的碎屑造成人員傷害。

3、本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。

細胞培養(yǎng)清除試劑