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      產(chǎn)品詳情

      產(chǎn)品信息

      產(chǎn)品名稱

      規(guī)格

      Lentivirus Concentration Solution (5×)

      100 mL


      產(chǎn)品描述

      Lentivirus Precipitation Solution(慢病毒濃縮液)是一種簡單、快速、高效的慢病毒濃縮試劑,能夠對所有類型的慢病毒顆粒進行簡單且有效的富集。該試劑操作簡便,僅需將慢病毒原液和5×慢病毒沉淀濃縮液按比例混合,并孵育一定時間,即可用普通高速離心機離心富集,得到濃縮的慢病毒顆粒,回收率可達90%以上,提高100倍病毒滴度。


      儲存與運輸

      冰袋(wet ice)運輸;4℃保存,12個月有效。



      組成

      Component


      Lentivirus Precipitation Solution (5×)

      100 mL

      產(chǎn)品說明書

      1份


      操作步驟

      1. 收集慢病毒上清液,用0.45 μm濾膜(推薦使用低蛋白吸收的PES膜)的無菌濾器過濾除去細胞和碎片(在過病毒原液之前,濾膜可用3-5 mL預冷PBS提前過一次);

      2. 將慢病毒上清液與5×慢病毒沉淀濃縮液按4:1(病毒上清液4份,病毒濃縮液1份)的比例顛倒混勻,將混合液于4℃孵育2 h,期間每隔30 min上下顛倒10次混勻,或置于4℃孵育過夜(適當延長孵化時間可以提高病毒回收率);

      3. 孵育一定時間后,于4℃,8000 g離心10~15 min;

      4. 小心去除上清,用原體積1/10~1/100的DMEM或PBS(推薦G4202)重懸慢病毒顆粒(部分情況下,沉淀物不一定肉眼可見),輕輕吹打均勻,重懸沉淀物后,可以測定濃縮慢病毒樣品的滴度后根據(jù)實驗使用量分裝并置于-80℃保存(盡量減少慢病毒反復凍融的次數(shù),以免降低病毒滴度)。


      注意事項

      1. 本試劑盒不提供濾器和注射器,請自備濾器和注射器。

      2. 本試劑盒成分雖然對慢病毒反復凍融有一定的保護作用,但是請盡量避免慢病毒反復凍融。

      3. 操作時請穿好實驗服、戴好手套。

       

      本產(chǎn)品僅供科研用途,不用于臨床診斷!

      常見問題
      問:細胞的運輸方式有哪些?有什么區(qū)別?

      答:公司提供兩種運輸方式供老師選擇,1、復蘇的活細胞:采用常溫發(fā)貨的方式,收到即可觀察密度并判斷是否進行傳代操作。優(yōu)勢是省去復蘇的步驟,細胞成活率較高。2、凍存的細胞:采用干冰運輸,一般情況下發(fā)貨是2支凍存管,收到后放-80過夜,第二天轉入液氮長期存儲,擇機復蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快,一般一兩天即可收到,缺點是需要自己復蘇。

      問:為什么你們的細胞和其他公司的細胞培養(yǎng)條件不一樣?

      答:我公司提供的細胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息,如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案,根據(jù)客戶的意愿進行選擇!

      問:培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復使用嗎?

      答:不可以重復使用,一般從我公司發(fā)出的細胞都需要達到一定的密度后發(fā)出,充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多,通常在3-5%,以維持細胞存活,控制生長速度,不可以用來做細胞培養(yǎng)使用。

      問:培養(yǎng)細胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點是什么?

      答:細胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點點,一般情況下是為貼壁的細胞或脫落的細胞死亡后的產(chǎn)物,懸浮細胞也會有這種現(xiàn)象,出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點。通常,白色的圓點是分散分布的,聚團類的懸浮細胞可能會聚團出現(xiàn)白色的亮斑,技術老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

      問:剛買回來的細胞如何凍存留種呢?

      答:一般情況下,我公司建議客戶收到細胞后傳1-2代后即可安排凍存留種,可先凍存1-2支凍存管,凍存的細胞數(shù)量多一些,便于后期復蘇。購買原代細胞的客戶,要充分考慮該細胞的傳代次數(shù)限制,人源原代細胞大概可以傳7代左右,鼠源的可以傳3代左右,對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細胞,不建議凍存,收到后調整狀態(tài)后即可安排實驗。

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