IPS人誘導多能干細胞培養(yǎng)體系
目錄價
¥ 3100.00
一鍵復制產(chǎn)品信息
別稱Culture system of induced pluripotent stem cells (iPSC)
貨號Delf-15763
規(guī)格
產(chǎn)品推薦
聯(lián)系方式
- 電話:400-1016-218
- 郵箱:355185756@qq.com
- 地址:安徽省合肥市高新區(qū)黃山路602號合肥國家大學科技園A401室
產(chǎn)品詳情
規(guī)格:500mL
儲存條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基2 ~ 8℃,添加劑-80 ~ -20℃;混勻后2 ~ 8℃,2周內(nèi)使用完畢。
產(chǎn)品簡介:
iPS細胞培養(yǎng)基是Delf技術(shù)股份有限公司開發(fā)出的一種適用于無飼養(yǎng)層培養(yǎng)、化學成分明確、并且不含動物源蛋白的人多潛能干細胞(hESC/hiPSC)完全培養(yǎng)基。iPS細胞培養(yǎng)基是在James Thomson實驗室開發(fā)的Essential 8培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上,由Delf改良研發(fā)出的最新型多潛能干細胞完全培養(yǎng)基。hESC/hiPSC在iPS細胞培養(yǎng)基中可以快速增殖,而分化的細胞則無法在該培養(yǎng)基中生長,從而選擇性擴增并獲得高純度多潛能干細胞。
產(chǎn)品內(nèi)容:
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名稱 |
規(guī)格 |
數(shù)量 |
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iPS細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 |
500mL |
1瓶 |
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iPS細胞添加劑 |
20mL |
1支 |
試劑準備:
iPS細胞完全培養(yǎng)基:將iPS細胞添加劑加入iPS細胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基中形成iPS細胞完全培養(yǎng)基(推薦每2mL添加劑與50mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基混合)。
iPS細胞完全培養(yǎng)基可在2-8℃穩(wěn)定儲存2-3周。
疑難解答:
?是否還需要往iPS細胞完全培養(yǎng)基中補充或添加成分?
不需要。iPS細胞培養(yǎng)基中各個成分的質(zhì)量和濃度都經(jīng)過了最優(yōu)化實驗,完全支持人ESC/iPSC的長期培養(yǎng),您無需再自行添加。
?培養(yǎng)基中有沉淀狀物質(zhì)是否是質(zhì)量問題?
添加劑在解凍過程中,若有少量沉淀析出,屬于正常現(xiàn)象,不影響使用,請充分混勻后與基礎(chǔ)培養(yǎng)基混合。但添加劑不能在37℃解凍,否則會析出大量沉淀,影響培養(yǎng)基的效價。如果培養(yǎng)基中出現(xiàn)大量沉淀,請不要使用。
?是否能在37 ℃反復水浴iPS細胞完全培養(yǎng)基?
不能。頻繁地在4℃和37℃之間轉(zhuǎn)換會導致iPS細胞完全培養(yǎng)基中含有的因子失活,iPS細胞完全培養(yǎng)基在使用前平衡至室溫即可。
? iPS細胞在傳代后不貼壁怎么解決?
造成iPS傳代后不貼壁的最可能的原因:
① 細胞消化時間不合適;②消化后吹打次數(shù)不合適,使得完成傳代后細胞集落過大或過小。
? iPS分化怎么處理?
①細胞在剛復蘇或傳代時,小的細胞團不呈現(xiàn)標準的克隆形態(tài),培養(yǎng)幾天或傳代后可恢復。②如果iPS分化的表現(xiàn)為干細胞克隆形態(tài)良好,克隆周邊出現(xiàn)散在的分化細胞,可通過高比例傳代(≥1:10),使得分化細胞的密度減少,低密度的分化細胞可被iPS培養(yǎng)體系篩選去除,如未完全去除,可用細胞刮或巴斯德管刮除。
③如果iPS分化的表現(xiàn)為克隆內(nèi)部松散,邊緣不平滑,在分化比例小或分化不嚴重的情況下,可通過連續(xù)傳代2 ~ 3次恢復,如果分化嚴重,建議棄除。
? 細胞復蘇率低是什么原因?
細胞復蘇需使用iPS細胞復蘇培養(yǎng)基,可大大提高細胞的復蘇效率。復蘇過程中,轉(zhuǎn)移細胞、吹打混勻和重懸細胞時,吹打力度要輕柔,并盡量減少吹打次數(shù),細胞接種后,即刻在顯微鏡下觀察細胞團塊的大小,4 ~ 10個細胞的團塊為最佳。如果吹打力度過大或次數(shù)過多,
導致細胞分散成單細胞,細胞復蘇率將偏低。
常見問題
答:公司提供兩種運輸方式供老師選擇,1、復蘇的活細胞:采用常溫發(fā)貨的方式,收到即可觀察密度并判斷是否進行傳代操作。優(yōu)勢是省去復蘇的步驟,細胞成活率較高。2、凍存的細胞:采用干冰運輸,一般情況下發(fā)貨是2支凍存管,收到后放-80過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲,擇機復蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快,一般一兩天即可收到,缺點是需要自己復蘇。
答:我公司提供的細胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息,如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案,根據(jù)客戶的意愿進行選擇!
答:不可以重復使用,一般從我公司發(fā)出的細胞都需要達到一定的密度后發(fā)出,充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多,通常在3-5%,以維持細胞存活,控制生長速度,不可以用來做細胞培養(yǎng)使用。
答:細胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點點,一般情況下是為貼壁的細胞或脫落的細胞死亡后的產(chǎn)物,懸浮細胞也會有這種現(xiàn)象,出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點。通常,白色的圓點是分散分布的,聚團類的懸浮細胞可能會聚團出現(xiàn)白色的亮斑,技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。
答:一般情況下,我公司建議客戶收到細胞后傳1-2代后即可安排凍存留種,可先凍存1-2支凍存管,凍存的細胞數(shù)量多一些,便于后期復蘇。購買原代細胞的客戶,要充分考慮該細胞的傳代次數(shù)限制,人源原代細胞大概可以傳7代左右,鼠源的可以傳3代左右,對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細胞,不建議凍存,收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實驗。








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