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      產(chǎn)品詳情

      產(chǎn)品說明(描述):

      利用我們的大腸桿菌表達系統(tǒng)生產(chǎn)了重組人表皮生長因子,并表達了編碼Asn971-Arg1023的目的基因。已知:表皮生長因子原;表皮生長因子;表皮生長因子;尿激素酮。

      表皮生長因子(EGF)是一種由53個氨基酸殘基組成的小蛋白,含有3個二硫鍵。它是一種小的有絲分裂蛋白,被認為與正常細胞生長、腫瘤形成和傷口愈合等機制有關(guān)。EGF在體內(nèi)和體外都能刺激各種表皮和上皮組織的生長,并能在細胞培養(yǎng)中刺激某些成纖維細胞的生長。該蛋白在序列和功能上與人α轉(zhuǎn)化生長因子(hTGFα)有很強的同源性,hTGFα是EGF受體位點的競爭對手。

      保存:   冷凍干燥蛋白應(yīng)保存在 -20℃,重組蛋白溶液可在4~7℃保存2~7天。

      制劑(配方):

      從0.2mMTris,200mMNaCl,pH8.0的0.2μm過濾液中冷凍干燥。

      質(zhì)量控制(質(zhì)量控制):

      純度經(jīng)還原SDS-PAGE測定,純度大于95%。

      內(nèi)毒素:經(jīng)LAL試驗測定<0.1ngg/μ(1EU/μg)。

      生物活性用BALB/c 3T3細胞進行細胞增殖實驗測定。

      其ED50為60-450pg/ml。

      圖片.png 

      復(fù)溶(重組):

      打開前一定要先離心試管。不要用旋渦或移液器混合。不建議重建到低于100μg/ml的濃度。冷凍干燥蛋白在蒸餾水中溶解。請將重新配制的溶液等份,以最大限度地減少凍融循環(huán)。

      常見問題
      問:細胞的運輸方式有哪些?有什么區(qū)別?

      答:公司提供兩種運輸方式供老師選擇,1、復(fù)蘇的活細胞:采用常溫發(fā)貨的方式,收到即可觀察密度并判斷是否進行傳代操作。優(yōu)勢是省去復(fù)蘇的步驟,細胞成活率較高。2、凍存的細胞:采用干冰運輸,一般情況下發(fā)貨是2支凍存管,收到后放-80過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲,擇機復(fù)蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快,一般一兩天即可收到,缺點是需要自己復(fù)蘇。

      問:為什么你們的細胞和其他公司的細胞培養(yǎng)條件不一樣?

      答:我公司提供的細胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息,如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案,根據(jù)客戶的意愿進行選擇!

      問:培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復(fù)使用嗎?

      答:不可以重復(fù)使用,一般從我公司發(fā)出的細胞都需要達到一定的密度后發(fā)出,充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多,通常在3-5%,以維持細胞存活,控制生長速度,不可以用來做細胞培養(yǎng)使用。

      問:培養(yǎng)細胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點是什么?

      答:細胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點點,一般情況下是為貼壁的細胞或脫落的細胞死亡后的產(chǎn)物,懸浮細胞也會有這種現(xiàn)象,出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點。通常,白色的圓點是分散分布的,聚團類的懸浮細胞可能會聚團出現(xiàn)白色的亮斑,技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

      問:剛買回來的細胞如何凍存留種呢?

      答:一般情況下,我公司建議客戶收到細胞后傳1-2代后即可安排凍存留種,可先凍存1-2支凍存管,凍存的細胞數(shù)量多一些,便于后期復(fù)蘇。購買原代細胞的客戶,要充分考慮該細胞的傳代次數(shù)限制,人源原代細胞大概可以傳7代左右,鼠源的可以傳3代左右,對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細胞,不建議凍存,收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實驗。

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