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大鼠原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞

目錄價(jià) ￥ 3550.00 一鍵復(fù)制產(chǎn)品信息

別稱(chēng)Rat primary liver parenchymal cells

貨號(hào)Delf-10881

規(guī)格 5×10?/T25培養(yǎng)瓶

細(xì)胞特性貼壁生長(zhǎng)

形態(tài)上皮樣，多角形細(xì)胞

來(lái)源大鼠；正常肝

傳代比例1:2傳代

用途僅供科研使用

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產(chǎn)品推薦

聯(lián)系方式

電話(huà)：
400-1016-218
郵箱：
355185756@qq.com
地址：
安徽省合肥市高新區(qū)黃山路602號(hào)合肥國(guó)家大學(xué)科技園A401室

產(chǎn)品詳情

一、細(xì)胞簡(jiǎn)介
細(xì)胞簡(jiǎn)介	該細(xì)胞來(lái)源于大鼠的正常肝組織。隨著人們生活水平的提高，飲食習(xí)慣的改變，腫瘤發(fā)病率也在不斷的增加，如肝癌、胃癌和大腸癌等明顯增加的趨勢(shì)。肝臟作為人體重要的器官，在整個(gè)物質(zhì)代謝過(guò)程中具有廣泛而多樣的功能。肝臟也是體內(nèi)藥物代謝的重要器官，體內(nèi)復(fù)雜的環(huán)境對(duì)藥物代謝等的影響是不言而喻的。但是在體研究藥物或其它化學(xué)物質(zhì)在肝細(xì)胞代謝的分子機(jī)制有一定的困難，因此我們建立體外的原代肝細(xì)胞培養(yǎng)模型用于肝細(xì)胞分子生物學(xué)特征的研究，作為對(duì)在體肝臟研究模型的有益補(bǔ)充。采用改良的灌流方法將肝臟中的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞分離、純化、體外培養(yǎng)，全面分析原代肝細(xì)胞的生長(zhǎng)和功能狀態(tài)，為肝細(xì)胞分子生物學(xué)特征的研究以及新藥對(duì)肝臟的作用機(jī)制的研究提供更有價(jià)值的線(xiàn)索，以更好的解釋藥物作用的機(jī)制。
細(xì)胞名稱(chēng)	大鼠原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞
細(xì)胞別稱(chēng)	Rat primary liver parenchymal cells
細(xì)胞貨號(hào)	Delf-10881
來(lái)源	大鼠；正常肝
細(xì)胞形態(tài)	上皮樣，多角形細(xì)胞
生長(zhǎng)特性	貼壁生長(zhǎng)
培養(yǎng)條件	推薦使用DELF原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)該細(xì)胞。
	名稱(chēng)	體積	濃度	保存條件
	原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基	500ml	1×	4℃、避光
	原代肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)添加劑	5ml	100×	-20℃、避光
	胎牛血清（FBS）	25ml	終濃度5%	-20℃、避光
	雙抗（青霉素/鏈霉素，P/S）	5ml	100×	-20℃、避光
培養(yǎng)環(huán)境	氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
二、細(xì)胞復(fù)蘇方法
復(fù)蘇步驟	1、將凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍； 2、加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻； 3、在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞； 4、將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)；
三、細(xì)胞傳代方法
傳代比例	1:2（具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定）
傳代方法	1、盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基； 2、用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次，吸走潤(rùn)洗的PBS； 3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）； 4、將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化（1到2分鐘，難消化的細(xì)胞適當(dāng)增加時(shí)間）； 5、消化到細(xì)胞大部分變圓并脫落，輕敲培養(yǎng)瓶后加入3-4ml完培終止消化； 6、混勻細(xì)胞吸出，1000rpm離心3-5min，棄上清；補(bǔ)加1-2ml完培吹勻； 7、按1:2分配到新的培養(yǎng)瓶中，添加6-8ml完培保持細(xì)胞生長(zhǎng)；
注意事項(xiàng)	不同品牌胰酶消化時(shí)間差別較大，可根據(jù)細(xì)胞形態(tài)判斷消化進(jìn)程
五、注意事項(xiàng)
注意事項(xiàng)	1、所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2、建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意：凍存管浸沒(méi)在液氮中會(huì)泄漏，并會(huì)慢慢充滿(mǎn)液氮。解凍時(shí)，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。 3、本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用。

STR鑒定

STR位點(diǎn)信息

操作流程

細(xì)胞復(fù)蘇、傳代與凍存操作流程下載

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常見(jiàn)問(wèn)題

問(wèn)：細(xì)胞的運(yùn)輸方式有哪些？有什么區(qū)別？

答：公司提供兩種運(yùn)輸方式供老師選擇，1、復(fù)蘇的活細(xì)胞：采用常溫發(fā)貨的方式，收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢(shì)是省去復(fù)蘇的步驟，細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞：采用干冰運(yùn)輸，一般情況下發(fā)貨是2支凍存管，收到后放-80過(guò)夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮長(zhǎng)期存儲(chǔ)，擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢(shì)是發(fā)貨快，一般一兩天即可收到，缺點(diǎn)是需要自己復(fù)蘇。

問(wèn)：為什么你們的細(xì)胞和其他公司的細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣？

答：我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫(kù)的培養(yǎng)信息，如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺(tái)。也有少部分細(xì)胞為客戶(hù)提供了替代培養(yǎng)方案，根據(jù)客戶(hù)的意愿進(jìn)行選擇！

問(wèn)：培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復(fù)使用嗎？

答：不可以重復(fù)使用，一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出，充液的培養(yǎng)基血清比例會(huì)比正常培養(yǎng)時(shí)所用到的培養(yǎng)液低很多，通常在3-5%，以維持細(xì)胞存活，控制生長(zhǎng)速度，不可以用來(lái)做細(xì)胞培養(yǎng)使用。

問(wèn)：培養(yǎng)細(xì)胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點(diǎn)是什么？

答：細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點(diǎn)點(diǎn)，一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物，懸浮細(xì)胞也會(huì)有這種現(xiàn)象，出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點(diǎn)。通常，白色的圓點(diǎn)是分散分布的，聚團(tuán)類(lèi)的懸浮細(xì)胞可能會(huì)聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑，技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

問(wèn)：剛買(mǎi)回來(lái)的細(xì)胞如何凍存留種呢？

答：一般情況下，我公司建議客戶(hù)收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種，可先凍存1-2支凍存管，凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些，便于后期復(fù)蘇。購(gòu)買(mǎi)原代細(xì)胞的客戶(hù)，要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制，人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右，鼠源的可以傳3代左右，對(duì)于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞，不建議凍存，收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實(shí)驗(yàn)。