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MTT 檢測試劑盒 200 T

目錄價 ￥ 90.00 一鍵復(fù)制產(chǎn)品信息

貨號Delf-16752

規(guī)格 200T 1000T

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產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品簡介

本產(chǎn)品MTT檢測試劑盒，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和活性測定，以及藥物對細(xì)胞毒性的檢測。MTT全稱為3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2-H-tetrazolium bromide，中文名噻唑藍(lán)。其檢測原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源底物MTT還原為不溶于水的藍(lán)紫色甲臜(Formazan)并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。再利用二甲基亞砜(DMSO)溶解細(xì)胞中的甲臜沉積物，用酶標(biāo)儀于490 nm或570 nm波長處測定其光吸收值，在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，甲臜形成的量與活細(xì)胞數(shù)成正比。根據(jù)測得的吸光度值(OD值)，來判斷活細(xì)胞數(shù)量，OD值越大，活細(xì)胞數(shù)越多，細(xì)胞活性越強(qiáng)(如果是測藥物毒性，則表示藥物毒性越小)。使用本試劑盒檢測細(xì)胞活性時，在進(jìn)行反應(yīng)后需吸除上清，因此不能用于懸浮細(xì)胞的檢測。

組成

Component Number	Component	KB210888	G4101-1000T
G4101-1	MTT工作液	10 mL	50 mL
G4101-2	DMSO	20 mL	100 mL
說明書		1份	1份

操作步驟

1. 貼壁細(xì)胞處理：待細(xì)胞貼壁后，按照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)進(jìn)行加藥、轉(zhuǎn)染等處理；

2. 細(xì)胞活性檢測：每孔加入20 μL MTT工作液，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育4 h；

3. 去除上清：完成孵育后，會發(fā)現(xiàn)孔板底部出現(xiàn)少量紫色結(jié)晶，可在40倍顯微鏡下觀察。用移液槍小心吸除孔板內(nèi)上清溶液（切勿吸到底部紫色結(jié)晶）；

4. 顯色：向孔板中加入100 μL DMSO，37℃孵育15 min左右（可用手指輕微敲擊板底小幅度震蕩），待紫色結(jié)晶全部溶解。如果紫色結(jié)晶較小較少，溶解的時間會短一些；如果紫色結(jié)晶較大較多，可適當(dāng)延長溶解時間；

5. 檢測：在波長490 nm或570 nm處測定吸光度。如無570 nm濾光片，可使用560-600 nm濾光片。

注意事項(xiàng)

1. DMSO在較低溫度時會凝固，可于37℃復(fù)溶后不影響使用。

2. 本試劑盒檢測原理是依賴于脫氫酶催化的反應(yīng)，樣品中如有較多還原劑(例如一些抗氧化劑)會干擾檢測，需設(shè)法去除。

3. 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

常見問題

問：細(xì)胞的運(yùn)輸方式有哪些？有什么區(qū)別？

答：公司提供兩種運(yùn)輸方式供老師選擇，1、復(fù)蘇的活細(xì)胞：采用常溫發(fā)貨的方式，收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢是省去復(fù)蘇的步驟，細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞：采用干冰運(yùn)輸，一般情況下發(fā)貨是2支凍存管，收到后放-80過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲，擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快，一般一兩天即可收到，缺點(diǎn)是需要自己復(fù)蘇。

問：為什么你們的細(xì)胞和其他公司的細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣？

答：我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息，如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案，根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇！

問：培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復(fù)使用嗎？

答：不可以重復(fù)使用，一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出，充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多，通常在3-5%，以維持細(xì)胞存活，控制生長速度，不可以用來做細(xì)胞培養(yǎng)使用。

問：培養(yǎng)細(xì)胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點(diǎn)是什么？

答：細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點(diǎn)點(diǎn)，一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物，懸浮細(xì)胞也會有這種現(xiàn)象，出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點(diǎn)。通常，白色的圓點(diǎn)是分散分布的，聚團(tuán)類的懸浮細(xì)胞可能會聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑，技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

問：剛買回來的細(xì)胞如何凍存留種呢？

答：一般情況下，我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種，可先凍存1-2支凍存管，凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些，便于后期復(fù)蘇。購買原代細(xì)胞的客戶，要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制，人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右，鼠源的可以傳3代左右，對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞，不建議凍存，收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實(shí)驗(yàn)。