THP-1 CELL GENE EDITING

THP-1細(xì)胞基因編輯

在血液粒細(xì)胞的研究中，THP-1是一個(gè)非常經(jīng)典的細(xì)胞模型。THP-1細(xì)胞被廣泛用于單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞相關(guān)的機(jī)制、信號(hào)通路以及營(yíng)養(yǎng)和藥物運(yùn)輸?shù)妊芯恐小Ｏ鄬?duì)于U937、HL-60、ML-2等白血病細(xì)胞系，THP-1更有類似人原代單核細(xì)胞的形態(tài)和功能特征（包括細(xì)胞分化標(biāo)記）。

相對(duì)于PBMC細(xì)胞，THP-1是一種永生系細(xì)胞系，更易在實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)和擴(kuò)增，且具有更穩(wěn)定的基因背景，不存在PBMC的個(gè)體差異性。因此，THP-1是各大實(shí)驗(yàn)室常用的研究免疫和炎癥的理想工具。

THP-1細(xì)胞系的優(yōu)點(diǎn):

1THP-1更有類似人原代單核細(xì)胞的形態(tài)和功能特征。

2THP-1單核細(xì)胞的增殖速度快（35~50小時(shí)），在特定的培養(yǎng)條件下增殖速度還能進(jìn)一步提高。生長(zhǎng)速率比PBMC來源的單核細(xì)胞要高得多。

3THP-1細(xì)胞系傳代穩(wěn)定性高，是一種永生化細(xì)胞系。可進(jìn)行多次傳代且細(xì)胞穩(wěn)定性和活性不變。

4THP-1細(xì)胞系的可用性高。THP-1細(xì)胞可以儲(chǔ)存數(shù)年，可穩(wěn)定復(fù)蘇，且不影響單核/巨噬細(xì)胞特征和活力。

5THP-1細(xì)胞系的同質(zhì)遺傳背景使得細(xì)胞表型穩(wěn)定，有利于實(shí)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性。而不同供體來源的PBMC衍生單核細(xì)胞往往變異性較高。

目前DELF生物經(jīng)過長(zhǎng)期細(xì)胞引進(jìn)與擴(kuò)增培養(yǎng)，已經(jīng)熟練掌握該細(xì)胞的克隆形成、轉(zhuǎn)染效率方面的技術(shù)能力，經(jīng)過我公司培養(yǎng)增殖后篩選出的HepG2細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)、狀態(tài)等方面都有大大提升，可大幅度提升成功獲得HepG2基因編輯細(xì)胞的概率。

在特定的誘導(dǎo)條件下，THP-1細(xì)胞可分化成單核/巨噬細(xì)胞，因此THP-1細(xì)胞可作為研究炎癥和免疫方向的細(xì)胞模型。

1THP-1可被佛波酯(PMA)誘導(dǎo)分化為巨噬細(xì)胞，并且可再通過脂多糖(LPS)和IFN-γ誘導(dǎo)M1極化，釋放出TNF-α、IL-6等細(xì)胞因子，這是典型的炎癥模型。

2通過 IL-4 、IL-13和巨噬細(xì)胞集落刺激因子（M-CSF）誘導(dǎo)可實(shí)現(xiàn)M2極化，分泌TGF-β、IL-10等抑制性細(xì)胞因子，這與炎癥后期的組織修復(fù)和重建的過程類似。

3在氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）的作用下，巨噬細(xì)胞可進(jìn)一步形成泡沫細(xì)胞，這是動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)出現(xiàn)的特征性病理細(xì)胞，是一種慢性炎癥模型。

當(dāng)CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)應(yīng)用于THP-1細(xì)胞，創(chuàng)建帶有特定基因修飾細(xì)胞模型，為免疫學(xué)和炎癥領(lǐng)域的研究帶來便利。

如何在THP-1細(xì)胞株進(jìn)行基因敲除/基因敲入/基因突變也是各個(gè)課題組的一個(gè)關(guān)心的問題！

經(jīng)過了長(zhǎng)期的技術(shù)研發(fā)，我們終于在根本上解決了這個(gè)THP-1細(xì)胞株的基因編輯的困難，可以為客戶提供編輯效率高、結(jié)果穩(wěn)定、周期快速的細(xì)胞基因敲除的解決方案。

CRISPR基因編輯細(xì)胞系（基于CRISPR/Cas9技術(shù)），通過優(yōu)化基因編輯載體和基因編輯流程，CRISPR技術(shù)的基因切割效率和重組效率是普通的CRISPR/Cas9技術(shù)的10倍以上，可輕松實(shí)現(xiàn)基因敲除（KO）、點(diǎn)突變（PM）、基因敲入（KI），定制您感興趣的基因編輯THP-1細(xì)胞系及其他單核細(xì)胞系，亦可為您實(shí)現(xiàn)各種轉(zhuǎn)基因的需求，助力您的研究。

我們的優(yōu)勢(shì)

CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)，可在幾周時(shí)間內(nèi)完成基因切割重組，編輯效率極高。

豐富的成功案例，DELF服務(wù)群體廣泛，已完成數(shù)百種細(xì)胞基因編輯項(xiàng)目，經(jīng)驗(yàn)豐富。

CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)廣泛應(yīng)用，可滿足基因的敲除/敲入/敲低/點(diǎn)突變等需求，效率高。

初步建立基因編輯細(xì)胞庫(kù)，利用龐大的優(yōu)勢(shì)，逐步建立起現(xiàn)貨KO細(xì)胞，可滿足少部分急需現(xiàn)貨的客戶群體。

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