一、細胞簡介

細胞簡介

該細胞來源于大鼠的正常腸組織。

巨噬細胞在不同組織中有不同的名稱。大部分在腸粘膜定居的巨噬細胞主要位于上皮下的粘膜固有層和集合淋巴小結、肌層外，因此腸巨噬細胞可作為消除從腸腔滲透進來的微生物的第一道防線。

腸道巨噬細胞直接接觸大量的細胞核抗原刺激物，作為機體免疫防御的第一道防線，這些巨噬細胞可以調節(jié)病原體感染后引起的炎癥反應，保護粘膜免受病原體的侵害，清理機體損傷處組織和細胞的壞死碎片。

細胞名稱

大鼠原代腸巨噬細胞

細胞別稱

Primary rat intestinal macrophages

細胞貨號

Delf-16936

來源

大鼠；正常腸組織。本細胞為終末分化細胞，增殖能力很弱，建議客戶收到細胞后直接用于后續(xù)實驗，不要進行擴增培養(yǎng)。

細胞形態(tài)

不規(guī)則細胞

生長特性

貼壁培養(yǎng)

培養(yǎng)條件

推薦使用DELF原代巨噬細胞專用培養(yǎng)基來培養(yǎng)該細胞。

名稱

體積

濃度

保存條件

原代巨噬細胞基礎培養(yǎng)基

500ml

1×

4℃、避光

原代巨噬細胞培養(yǎng)添加劑

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清（FBS）

50ml

終濃度10%

-20℃、避光

雙抗（青霉素/鏈霉素，P/S）

5ml

100×

-20℃、避光

培養(yǎng)環(huán)境

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

二、細胞復蘇方法

復蘇步驟

1、將凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍；
2、加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻；
3、在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞；
4、將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)；

三、細胞傳代方法

傳代比例

1:2（具體情況視細胞生長速度及密度決定）

傳代方法

1、盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；
2、用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次，吸走潤洗的PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化（1到2分鐘，難消化的細胞適當增加時間）；
5、消化到細胞大部分變圓并脫落，輕敲培養(yǎng)瓶后加入3-4ml完培終止消化；
6、混勻細胞吸出，1000rpm離心3-5min，棄上清；補加1-2ml完培吹勻；
7、按1:2分配到新的培養(yǎng)瓶中，添加6-8ml完培保持細胞生長；

注意事項

不同品牌胰酶消化時間差別較大，可根據細胞形態(tài)判斷消化進程

五、注意事項

注意事項

1、所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2、建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。

3、本產品僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用。