產品描述

種屬: 人源（Homo sapiens）

組織來源: 乳腺（Pancreas）

疾病: 乳腺癌（Pancreatic cancer）

年齡: 未知（Unknown）

性別: 未知（Unknown）

細胞形態(tài): 纖維細胞（Fibroblast）

生長特性: 貼壁生長（Adherent）

拆包 & 存儲

1. 請立即檢查包裝袋是否有破損或漏液

2. 請立即將細胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出，并按照下方操作步驟進行培養(yǎng)傳代

注意：如為凍存管，請收到后立即解凍培養(yǎng)。若來不及解凍，請儲存于液氮中（存儲于負80度，會降低細胞存活率）

培養(yǎng)瓶中細胞操作步驟

對于貼壁培養(yǎng)的細胞，寄送前，我們會將運輸培養(yǎng)基（收到后請使用完全培養(yǎng)基培養(yǎng)）充滿整個培養(yǎng)瓶，以減少產品運輸過程中貼壁細胞的脫落。

1. 收到細胞產品后，請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細檢查是否渾濁、是否細菌污染。因在運輸過程中存在顛簸，且有些細胞對溫度變化也很敏感，可能存在一些細胞脫落漂浮的情況，這些細胞仍是活細胞，請勿丟棄，可離心富集后傳代使用。

2. 對于貼壁的細胞，在生物安全柜環(huán)境中，用真空泵去除培養(yǎng)瓶中的多余培養(yǎng)基，至剩余5-8mL左右，隨后將細胞置于含有5%CO?的37℃恒溫 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，擰松瓶蓋。如果細胞已經長滿培養(yǎng)瓶請立即傳代。

3. 對于懸浮的細胞，在生物安全柜環(huán)境中，轉移培養(yǎng)瓶中的細胞至離心管中，離心200×g / 5 - 10 min，去除上清后，用5 mL培養(yǎng)基吹散細胞，轉移至新的培養(yǎng)瓶中，隨后置于含有5%CO?的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

凍存細胞操作步驟

注意：為保存細胞的高存活率，請收到產品后，立即解凍培養(yǎng)。

1.將凍存管置于37℃ 水浴中來回晃動，迅速解凍。為避免污染， 確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速，大約2分鐘。

2. 一旦凍存管中液體融化后，立即取出，采用 70%酒精噴拭凍存管表面。從此步開始，后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。

3.將凍存管中的液體轉移到含有5mL完全培養(yǎng)基的離心管中， 離心200×g / 5 - 10 min，用真空泵去除含有凍存液的上清。

4. 用完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞并轉移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細胞復蘇的存活率，請將培養(yǎng)基在37℃水浴預熱后使用。

5. 將細胞置于含有5%CO?的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

貼壁細胞傳代培養(yǎng)

1. 吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基，加入PBS清洗一次。

2. 加入 1.0 mL 0.25（w/v）Trypsin-0.53mM EDTA溶液，并置于37 ℃培養(yǎng)箱中孵育，直至細胞從壁上脫落分離。此過程大約需要3至5分鐘（此處為12.5 cm2 培養(yǎng)瓶所用體積，可根據實際情況增減用量）。

3.加入2mL完全培養(yǎng)基中和胰蛋白酶，并輕輕吹打將細胞從培養(yǎng)瓶表面吹落，并使細胞分散。

4.離心200x g/5 min，去除上清后，取適量的培養(yǎng)基將細胞重懸, 取適量懸液置于新的培養(yǎng)瓶中，并加入新鮮細胞完全培養(yǎng)基至總體積為4mL。

5. 將細胞置于含有5%CO?的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

傳代比例：建議 1:2 至 1:3 （以培養(yǎng)瓶底面積計算）

培養(yǎng)基換液: 每隔 2 至 3 天。

完全培養(yǎng)基配制

該細胞系培養(yǎng)所用培養(yǎng)基為成纖維細胞專用培養(yǎng)基。

使用范圍

本產品僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用。