產品描述

種屬: 人源（Homo sapiens）

組織來源: 外周血（Peripheral Blood）

疾病: 未知（Unknown）

年齡: 未知（Unknown）

性別: 未知（Unknown）

生長特性: 貼壁生長（Adherent）

拆包 & 存儲

1. 請立即檢查包裝袋是否有破損或漏液

2. 請立即將細胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出，并按照下方操作步驟進行培養(yǎng)傳代

注意：如為凍存管，請收到后立即解凍培養(yǎng)。若來不及解凍，請儲存于液氮中（存儲于負80度，會降低細胞存活率）

細胞操作步驟

一、 鋪板

1. 提前一天在4℃冰箱中解凍干細胞鋪底工作液添加劑。

2. 用預冷的移液管將鋪底工作液添加劑和鋪底工作液基礎液按照1:9的比例混勻。

3. 將鋪底工作液覆蓋瓶底（6孔板1mL，依次類推），置于37℃培養(yǎng)箱過夜。

4. 使用前，用PBS洗滌一次。

注意：可根據(jù)試劑用量將鋪底工作液添加劑分裝保存-80℃，避免反復凍融。

二、 細胞復蘇

1. 首先開啟復蘇添加劑小瓶上的鋁蓋，并用酒精棉擦拭其表面， 使用注射器吸取5mL復蘇基礎培養(yǎng)基加入到瓶中，顛倒混勻。

2. 將復蘇添加劑和復蘇基礎液按照0.5mL：10mL的比例混勻，配置后的復蘇完全培養(yǎng)基保存4℃（可保存2周，可根據(jù)試劑用量將添加劑分裝保存于-80℃，避免反復凍融）。

3. 37℃水浴中，迅速解凍細胞，用酒精棉擦拭，轉移至無菌操作臺中。

4. 將細胞懸浮液轉移至含有5mL復蘇完全培養(yǎng)基的15mL離心管中200g離心5min。

5.棄上清，加入適量復蘇完全培養(yǎng)基，輕柔重懸細胞，接種到包被好的培養(yǎng)瓶中。

6. 水平十字搖勻，室溫放置15min.顯微鏡下觀察大部分細胞貼壁后，放入5%CO?的37℃培養(yǎng)箱中。

7. 培養(yǎng)24h后，棄掉復蘇完全培養(yǎng)基，加入新鮮的干細胞完全培養(yǎng)基（配置見下）

三、細胞傳代

1. 首先室溫解凍干細胞完全培養(yǎng)基添加劑，按照每2mL添加劑與50mL干細胞基礎培養(yǎng)基比例混勻。（注意：可根據(jù)試劑用量將添加劑分裝保存于-80℃，避免反復凍融。）

2. 將完全培養(yǎng)基平衡至室溫，取出包被過的培養(yǎng)皿，吸走包被液并加入適量完全培養(yǎng)基，置于37℃培養(yǎng)箱中預熱。

3. 吸走細胞中上清并加入無鈣鎂PBS洗滌一次，加入適量干細胞消化液，37℃孵育4-6min,顯微鏡下大部分克隆邊緣開始脫落，克隆內細胞間隙明顯則可。

4. 吸去消化液，加入完全培養(yǎng)基，輕柔吹細胞，轉移到新培養(yǎng)板中。

5.水平十字搖勻，室溫放置15min.顯微鏡下觀察大部分細胞貼壁后，放入5%CO?的37℃培養(yǎng)箱中。

傳代比例：建議 1:3 至 1:4 （以培養(yǎng)瓶底面積計算）

培養(yǎng)基換液: 每天換液。

完全培養(yǎng)基配制

該細胞系培養(yǎng)所用基本培養(yǎng)基為hiPSC-B1專用培養(yǎng)基。

使用范圍

本產品僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用。