一、細胞簡介

細胞簡介

SF21昆蟲卵巢細胞，該細胞系(全名:IPLB-SF-21-AE)來源于秋季粘蟲草地貪夜蛾蛹(鱗翅目夜蛾科草地貪夜蛾種)的未成熟卵巢；細胞易受桿狀病毒感染；也可參見SF-9 (DSMZ ACC 125 ),它是由SF-21衍生而來的。

細胞名稱

SF21昆蟲卵巢細胞

細胞貨號

Delf-24689

來源

昆蟲-秋季粘蟲(草地夜蛾)

細胞形態(tài)

圓形梭形混合樣

細胞類型

腫瘤細胞

生長特性

大多數貼壁，少數懸浮

培養(yǎng)條件

昆蟲細胞培養(yǎng)基；優(yōu)質胎牛血清，10%；雙抗，1%。

培養(yǎng)環(huán)境

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

二、細胞復蘇方法

復蘇步驟

1、將凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍；
2、加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻；
3、在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細胞；
4、將細胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)；

三、細胞傳代方法

傳代比例

1:2（具體情況視細胞生長速度及密度決定）

傳代方法

1、將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中；
2、用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次，連同PBS一同回收離心管中；
3、將培養(yǎng)瓶中懸浮的細胞收集完后，使用細胞刮刀收集瓶內貼壁細胞；
4、將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和收集到的貼壁細胞以1000rpml離心5min，棄去上清；
5、補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中；
6、添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力；

注意事項

該細胞不用胰酶消化，使用細胞刮刀

四、細胞凍存方法

凍存液配方

凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配（推薦使用DELF無血清非程序細胞凍存液Delf-16090進行凍存細胞，快速，便捷）。

凍存規(guī)格

按每1ml凍存液含1×10⁶~1×10⁷個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。

凍存方法

1、消化并離心收集細胞，計數，推薦凍存密度為1×10⁶~1×10⁷個活細胞/ml；
2、將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存管；
3、將凍存管轉入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉入-80度過夜，第二天轉入液氮保存；

五、注意事項

注意事項

1、所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2、建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會泄漏，并會慢慢充滿液氮。解凍時，液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子，從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。

3、本產品僅限于科學研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用。