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組化制片（滴片/涂片）

組化制片（滴片/涂片），服務介紹：采集的液體標本(如血液、菌液、細胞等)均勻的涂抹或滴在玻璃片上制成的標本,用于后期染色及相關實驗室診斷等。實驗周期：1個工作日。實驗流程：一、涂片制備：1.取細胞懸液，2800r4℃離心5min，棄上清液，根據(jù)底部沉淀的細胞量加入2mL甲醇固定。若肉眼看不見細胞沉淀時，用3000r/min，4℃離心10min。2.取用甲醇重懸的細胞懸液，2800r25℃離心5min，棄上清液，根據(jù)底部沉......

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產(chǎn)品詳情

服務介紹：

采集的液體標本(如血液、菌液、細胞等)均勻的涂抹或滴在玻璃片上制成的標本,用于后期染色及相關實驗室診斷等。

實驗周期：1個工作日。

實驗流程：

一、涂片制備：

1.取細胞懸液，2800r 4℃離心5min，棄上清液，根據(jù)底部沉淀的細胞量加入2mL甲醇固定。若肉眼看不見細胞沉淀時，用3000r/min，4℃離心10min。

2.取用甲醇重懸的細胞懸液，2800r 25℃離心5min，棄上清液，根據(jù)底部沉淀加入PBS：

①若肉眼看不見細胞沉淀時，用3000r/min，25℃離心10min，依然無沉淀時，留取底部約0.2ml的液體，再加入0.5mL的PBS混勻后用移液槍吸取200μL，滴于提前用組化筆畫好的小圓圈中(3cm×2cm的橢圓);

②若細胞沉淀量很少，綠豆大小時，棄上清，留取底部沉淀，加入0.5mL PBS,用移液槍吹打混勻后，吸取200μL，涂于提前用組化筆畫好的小圓圈中(3cm×2cm的橢圓);

③若細胞沉淀量很多，黃豆大小或更大時，棄上清，留取底部沉淀，加入2mL PBS,用移液槍吹打混勻后，吸取150μL，涂于提前用組化筆畫好的大圓圈中(最大長邊約5cm，最大短邊約2cm的橢圓)，在顯微鏡下觀察細胞量的多少，若還是過厚，再用PBS對倍稀釋該細胞懸液，直至在顯微鏡下觀察到細胞量涂布均勻。

3.用槍將細胞懸液鋪滿整個圓圈，涂片放置自然晾干。

二、送樣運輸要求：4℃保存運輸

常見問題

問：細胞的運輸方式有哪些？有什么區(qū)別？

答：公司提供兩種運輸方式供老師選擇，1、復蘇的活細胞：采用常溫發(fā)貨的方式，收到即可觀察密度并判斷是否進行傳代操作。優(yōu)勢是省去復蘇的步驟，細胞成活率較高。2、凍存的細胞：采用干冰運輸，一般情況下發(fā)貨是2支凍存管，收到后放-80過夜，第二天轉入液氮長期存儲，擇機復蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快，一般一兩天即可收到，缺點是需要自己復蘇。

問：為什么你們的細胞和其他公司的細胞培養(yǎng)條件不一樣？

答：我公司提供的細胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息，如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案，根據(jù)客戶的意愿進行選擇！

問：培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復使用嗎？

答：不可以重復使用，一般從我公司發(fā)出的細胞都需要達到一定的密度后發(fā)出，充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多，通常在3-5%，以維持細胞存活，控制生長速度，不可以用來做細胞培養(yǎng)使用。

問：培養(yǎng)細胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點是什么？

答：細胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點點，一般情況下是為貼壁的細胞或脫落的細胞死亡后的產(chǎn)物，懸浮細胞也會有這種現(xiàn)象，出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點。通常，白色的圓點是分散分布的，聚團類的懸浮細胞可能會聚團出現(xiàn)白色的亮斑，技術老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

問：剛買回來的細胞如何凍存留種呢？

答：一般情況下，我公司建議客戶收到細胞后傳1-2代后即可安排凍存留種，可先凍存1-2支凍存管，凍存的細胞數(shù)量多一些，便于后期復蘇。購買原代細胞的客戶，要充分考慮該細胞的傳代次數(shù)限制，人源原代細胞大概可以傳7代左右，鼠源的可以傳3代左右，對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細胞，不建議凍存，收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實驗。