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拍照（偏振光）

拍照（偏振光），服務(wù)介紹：正置顯微鏡型號：NIKONEclipseci;軟件：NIS_F_Ver43000_64bit_E;成像系統(tǒng)：NIKONdigitalsightDS-FI2。可選擇20×、40×、100×、200×和400×不同放大倍數(shù)。偏振光拍照是利用光的偏振特性對具有雙折射性物質(zhì)進(jìn)行拍照采集圖像。在生物體中，不同的纖維蛋白結(jié)構(gòu)顯示出明顯的各向異性，使用偏光顯微鏡可得到這些纖維中分子排列的詳細(xì)情況，如膠......

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服務(wù)介紹：

正置顯微鏡型號：NIKON Eclipse ci;軟件：NIS_F_Ver43000_64bit_E;成像系統(tǒng)：NIKON digital sight DS-FI2。可選擇 20×、40×、100×、200×和400×不同放大倍數(shù)。

偏振光拍照是利用光的偏振特性對具有雙折射性物質(zhì)進(jìn)行拍照采集圖像。在生物體中，不同的纖維蛋白結(jié)構(gòu)顯示出明顯的各向異性，使用偏光顯微鏡可得到這些纖維中分子排列的詳細(xì)情況，如膠原蛋白等。雙折射性是晶體的基本特征，因此也被廣泛應(yīng)用在結(jié)石、尿酸晶體等。淀粉樣蛋白的生化成分和來源不盡相同，但在染色和某些物理性狀方面具有許多共同性，可被剛果紅染成磚紅色，偏振光下呈特有的綠色雙折光。下圖就是利用偏振光顯微鏡拍攝的天狼猩紅染色結(jié)果。

實驗流程：

(1)樣片接收：天狼猩紅染色切片、剛果紅染色切片、自身會在偏振光下呈現(xiàn)特異性改變的切片等

(2)實驗步驟：按要求選擇相應(yīng)視野以及倍數(shù)拍照

(3)實驗結(jié)果：圖片×6(常規(guī)同視野下200×3、400×3)

注意事項：

(1) 拍照倍數(shù)可選;

(2) 默認(rèn)圖片格式JPG，可備注TIF格式保存;

(3) 默認(rèn)圖片分辨率大小為1280*960或1440*1024;

(4) 默認(rèn)圖片不加標(biāo)尺，需要請在交接單上注明。也可后期在圖片的基礎(chǔ)上加;

(5) 如無拍照要求，即按陽性明顯的區(qū)域拍攝。

送樣運輸要求：

切片盒保存運輸。

常見問題

問：細(xì)胞的運輸方式有哪些？有什么區(qū)別？

答：公司提供兩種運輸方式供老師選擇，1、復(fù)蘇的活細(xì)胞：采用常溫發(fā)貨的方式，收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢是省去復(fù)蘇的步驟，細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞：采用干冰運輸，一般情況下發(fā)貨是2支凍存管，收到后放-80過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲，擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快，一般一兩天即可收到，缺點是需要自己復(fù)蘇。

問：為什么你們的細(xì)胞和其他公司的細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣？

答：我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息，如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案，根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇！

問：培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復(fù)使用嗎？

答：不可以重復(fù)使用，一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出，充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多，通常在3-5%，以維持細(xì)胞存活，控制生長速度，不可以用來做細(xì)胞培養(yǎng)使用。

問：培養(yǎng)細(xì)胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點是什么？

答：細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點點，一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物，懸浮細(xì)胞也會有這種現(xiàn)象，出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點。通常，白色的圓點是分散分布的，聚團(tuán)類的懸浮細(xì)胞可能會聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑，技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

問：剛買回來的細(xì)胞如何凍存留種呢？

答：一般情況下，我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種，可先凍存1-2支凍存管，凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些，便于后期復(fù)蘇。購買原代細(xì)胞的客戶，要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制，人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右，鼠源的可以傳3代左右，對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞，不建議凍存，收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實驗。