蛋白免疫印跡WB
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一鍵復制產(chǎn)品信息
產(chǎn)品推薦
聯(lián)系方式
- 電話:400-1016-218
- 郵箱:355185756@qq.com
- 地址:安徽省合肥市高新區(qū)黃山路602號合肥國家大學科技園A401室
產(chǎn)品詳情
蛋白免疫印跡(Western Blot)是將組織或細胞總蛋白質(zhì)經(jīng)電泳分離后轉(zhuǎn)移到NC膜或PVDF膜上,然后利用特異性抗體檢測某特定抗原的一種蛋白檢測技術(shù),已廣泛應用于蛋白表達檢測、抗體活性檢測及疾病早期診斷等多個領(lǐng)域。
Western blot 流程圖

我們的優(yōu)勢:
1、高環(huán)評、標準化、開放式實驗室,客戶可全程跟蹤實驗;
2、購有純水儀、化學發(fā)光成像系統(tǒng)等整套新進儀器設備;
3、標準的SOP操作規(guī)程,確保實驗數(shù)據(jù)真實、客觀、可靠!
4、代理多廠家品牌抗體,種類齊全!
5、成熟蛋白提取技術(shù),可提取總蛋白、核/膜蛋白、線粒體蛋白等多種特殊蛋白
6、檢測蛋白大小范圍:4-200kDa左右
服務周期
1、總蛋白提取 1-3工作日
2、總蛋白提取 1-3工作日
3、線粒體蛋白提取 1-3工作日
4、抗體最佳濃度摸索 5-7工作日
5、總蛋白WB跑膠 5-7工作日
6、磷酸化蛋白WB跑膠 5-7工作日
7、乙酰化蛋白WB跑膠 5-7工作日
8、灰度值等分析報告 5-7工作日
樣本準備要求:
組織樣本:組織1cm×1cm×1cm大小,冰上取材,用生理鹽水洗凈去除血漬和污物,并剔除非研究所需的組織,放入已標記的凍存管中,液氮速凍后,轉(zhuǎn)運至-80℃冰箱保存,干冰運輸。
細胞樣本:培養(yǎng)好的細胞用細胞刮刮下或胰酶消化,離心收集細胞團,細胞團要求 1×107 如米粒或黃豆大小,液氮速凍后放入-80 ℃冰箱中保存,干冰運輸。
全血樣本:肝素鈉(綠頭)或EDTA(紫頭)抗凝管采集全血1ml,上下顛倒幾次使血液與抗凝劑充分混勻,1h之內(nèi)進行白細胞提取,細胞團要求 1×107 如米粒或黃豆大小,液氮速凍后放入-80 ℃冰箱中保存,干冰運輸。
蛋白提取液:總蛋白濃度(細胞不低于3μg/μl,組織不低于5μg/μl)。
注意:提取后的蛋白建議經(jīng)過濃度測定,再進行變性,變性時先加入Sample buffer,再95℃ 水浴10min,緩慢恢復至室溫后離心。變性的蛋白可直接超低溫保存(-80℃冰箱保存或干冰運輸)。
交付標準:
1.完整實驗報告一份(包括所用到試劑耗材、儀器設備、操作步驟、原始數(shù)據(jù)和實驗分析結(jié)果)。
2.剩余的樣本和試劑
常見問題
答:公司提供兩種運輸方式供老師選擇,1、復蘇的活細胞:采用常溫發(fā)貨的方式,收到即可觀察密度并判斷是否進行傳代操作。優(yōu)勢是省去復蘇的步驟,細胞成活率較高。2、凍存的細胞:采用干冰運輸,一般情況下發(fā)貨是2支凍存管,收到后放-80過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲,擇機復蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快,一般一兩天即可收到,缺點是需要自己復蘇。
答:我公司提供的細胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息,如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案,根據(jù)客戶的意愿進行選擇!
答:不可以重復使用,一般從我公司發(fā)出的細胞都需要達到一定的密度后發(fā)出,充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多,通常在3-5%,以維持細胞存活,控制生長速度,不可以用來做細胞培養(yǎng)使用。
答:細胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點點,一般情況下是為貼壁的細胞或脫落的細胞死亡后的產(chǎn)物,懸浮細胞也會有這種現(xiàn)象,出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點。通常,白色的圓點是分散分布的,聚團類的懸浮細胞可能會聚團出現(xiàn)白色的亮斑,技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。
答:一般情況下,我公司建議客戶收到細胞后傳1-2代后即可安排凍存留種,可先凍存1-2支凍存管,凍存的細胞數(shù)量多一些,便于后期復蘇。購買原代細胞的客戶,要充分考慮該細胞的傳代次數(shù)限制,人源原代細胞大概可以傳7代左右,鼠源的可以傳3代左右,對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細胞,不建議凍存,收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實驗。










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