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DELF快速支原體檢測試劑盒(等溫擴(kuò)增法)

目錄價 ￥ 880.00 一鍵復(fù)制產(chǎn)品信息

貨號Delf-28681

規(guī)格 50 rxns

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產(chǎn)品推薦

聯(lián)系方式

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355185756@qq.com
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安徽省合肥市高新區(qū)黃山路602號合肥國家大學(xué)科技園A401室

產(chǎn)品詳情

產(chǎn)品簡介

本產(chǎn)品利用等溫擴(kuò)增技術(shù)與可視化顏色變化能夠快速檢測細(xì)胞培養(yǎng)液中常見的8種支原體，無需DNA提取，直接在反應(yīng)液中加入1 μL細(xì)胞培養(yǎng)上清，65℃反應(yīng)30 min，陽性樣本反應(yīng)液顏色由黃色變?yōu)榧t色，整個過程無需PCR儀，無需開蓋電泳，可有效避免氣溶膠造成的交叉污染。與傳統(tǒng)的PCR法相比，本產(chǎn)品操作簡便、靈敏度非常高，可耐受培養(yǎng)基中的多種PCR抑制劑，因此不會出現(xiàn)假陰性現(xiàn)象，檢測結(jié)果與qPCR具有極高的一致性。

儲存與運輸

冰袋（wet ice）運輸；-20℃保存；有效期12個月。

組成

Component	規(guī)格
Mycored Buffer	1.2 mL
Mycored Enzyme	50 μL
Positive Control	50 μL
Paraffin Oil	1 mL

a：包含顯色劑。

實驗前準(zhǔn)備

1、65℃水浴鍋或金屬浴；

操作步驟

1、待測樣本準(zhǔn)備

1)貼壁細(xì)胞：直接吸取上清。建議在細(xì)胞接種或換液3天以上，匯合度達(dá)到90%左右時取樣，此時上清中支原體含量較高，容易檢出。

2) 懸浮細(xì)胞：1000 rpm離心5 min后，取上清。建議在細(xì)胞接種或換液3天以上時取樣，此時細(xì)胞培養(yǎng)液中支原體含量較高，容易檢出。

2、反應(yīng)體系

Component	規(guī)格
Mycored Buffer	23 μL
MycoRed Enzyme	1 μL

a：Mycored Buffer解凍后顛倒混勻使用。

b：根據(jù)樣本數(shù)量，將以上反應(yīng)體系配好之后，分裝到反應(yīng)管中，加入20 μL的Paraffin Oil，再進(jìn)行下一步。

3.加樣

1）陰性對照：第一個反應(yīng)管中不加任何樣本作為陰性對照；

2）陽性對照：向最后一個反應(yīng)管中加入1 μL Positive Control作為陽性對照；

3）待測樣本：向其余反應(yīng)管中加入1 μL細(xì)胞培養(yǎng)上清。

請將槍頭伸向Paraffin Oil液面下加樣。

4.反應(yīng)條件。

將反應(yīng)管轉(zhuǎn)移至提前預(yù)熱的65℃水浴鍋或金屬浴中，孵育30 min，如果顯色不明顯可將反應(yīng)時間延長至40 min。

結(jié)果判定

反應(yīng)結(jié)束后立即將反應(yīng)管取出，待恢復(fù)至室溫后，如果反應(yīng)液仍為黃色，判斷結(jié)果為陰性；如果反應(yīng)液變?yōu)榧t色，判斷結(jié)果則為陽性。反應(yīng)管不可開蓋，否則很容易導(dǎo)致氣溶膠污染。

圖例：

注意事項

1. 反應(yīng)結(jié)束后請勿打開反應(yīng)管。

2. 建議在配制反應(yīng)液過程中使用帶濾芯的吸頭，并將棄掉的吸頭和反應(yīng)管放入自封袋中，及時處理。

3. 請經(jīng)常使用核酸清除劑擦拭實驗臺和移液器。

常見問題

問：細(xì)胞的運輸方式有哪些？有什么區(qū)別？

答：公司提供兩種運輸方式供老師選擇，1、復(fù)蘇的活細(xì)胞：采用常溫發(fā)貨的方式，收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢是省去復(fù)蘇的步驟，細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞：采用干冰運輸，一般情況下發(fā)貨是2支凍存管，收到后放-80過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲，擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快，一般一兩天即可收到，缺點是需要自己復(fù)蘇。

問：為什么你們的細(xì)胞和其他公司的細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣？

答：我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息，如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案，根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇！

問：培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復(fù)使用嗎？

答：不可以重復(fù)使用，一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出，充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多，通常在3-5%，以維持細(xì)胞存活，控制生長速度，不可以用來做細(xì)胞培養(yǎng)使用。

問：培養(yǎng)細(xì)胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點是什么？

答：細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點點，一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物，懸浮細(xì)胞也會有這種現(xiàn)象，出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點。通常，白色的圓點是分散分布的，聚團(tuán)類的懸浮細(xì)胞可能會聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑，技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

問：剛買回來的細(xì)胞如何凍存留種呢？

答：一般情況下，我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種，可先凍存1-2支凍存管，凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些，便于后期復(fù)蘇。購買原代細(xì)胞的客戶，要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制，人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右，鼠源的可以傳3代左右，對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞，不建議凍存，收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實驗。