一、細(xì)胞簡(jiǎn)介

細(xì)胞簡(jiǎn)介

該細(xì)胞來(lái)源于人的正常前列腺組織。

前列腺是男性特有的性腺器官，由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺腺體的中間有尿道穿過(guò)，扼守著尿道上口，所以，前列腺有病，排尿首先受影響。前列腺是具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺，前列腺分泌前列腺液，是構(gòu)成精液主要成分；作為內(nèi)分泌腺，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素”。

前列腺表面有一層被膜。其內(nèi)有較多的彈性纖維和平滑肌，這些成分可伸入腺內(nèi)，組成前列腺的支架，前列腺的實(shí)質(zhì)由30-50個(gè)復(fù)管泡狀腺組成，共有15-30條導(dǎo)管開(kāi)口于尿道精阜的兩側(cè)，按腺體的分布，可分成粘膜腺，粘膜下腺和主腺。其腺泡上皮為單層立方，單層柱狀或假?gòu)?fù)層柱狀；形態(tài)不一，且腺腔不規(guī)則；腺泡腔內(nèi)常見(jiàn)凝固體，上皮細(xì)胞的分泌物濃縮而成。

細(xì)胞名稱

人原代前列腺上皮細(xì)胞

細(xì)胞別稱

Primary human prostate epithelial cells；HPEpiC

細(xì)胞貨號(hào)

Delf-10648

來(lái)源

人；正常前列腺

細(xì)胞形態(tài)

上皮樣，多角形細(xì)胞

生長(zhǎng)特性

貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)條件

推薦使用DELF原代上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)該細(xì)胞。

名稱

體積

濃度

保存條件

原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

500mL

1×

4℃、避光

原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑

5mL

100×

-20℃、避光

胎牛血清（FBS）

10mL

終濃度2%

-20℃、避光

雙抗（青霉素/鏈霉素，P/S）

5ml

100×

-20℃、避光

培養(yǎng)環(huán)境

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

二、細(xì)胞復(fù)蘇方法

復(fù)蘇步驟

1、將凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍；
2、加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻；
3、在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞；
4、將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)；

三、細(xì)胞傳代方法

傳代比例

1:2（具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定）

傳代方法

1、盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；
2、用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次，吸走潤(rùn)洗的PBS；
3、加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）；
4、將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化（1到2分鐘，難消化的細(xì)胞適當(dāng)增加時(shí)間）；
5、消化到細(xì)胞大部分變圓并脫落，輕敲培養(yǎng)瓶后加入3-4ml完培終止消化；
6、混勻細(xì)胞吸出，1000rpm離心3-5min，棄上清；補(bǔ)加1-2ml完培吹勻；
7、按1:2分配到新的培養(yǎng)瓶中，添加6-8ml完培保持細(xì)胞生長(zhǎng)；

注意事項(xiàng)

不同品牌胰酶消化時(shí)間差別較大，可根據(jù)細(xì)胞形態(tài)判斷消化進(jìn)程

五、注意事項(xiàng)

注意事項(xiàng)

1、所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2、建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意：凍存管浸沒(méi)在液氮中會(huì)泄漏，并會(huì)慢慢充滿液氮。解凍時(shí)，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。

3、本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。