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IPS人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞培養(yǎng)體系

目錄價(jià) ￥ 3100.00 一鍵復(fù)制產(chǎn)品信息

別稱Culture system of induced pluripotent stem cells (iPSC)

貨號(hào)Delf-15763

規(guī)格 500ml

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產(chǎn)品推薦

聯(lián)系方式

電話：
400-1016-218
郵箱：
355185756@qq.com
地址：
安徽省合肥市高新區(qū)黃山路602號(hào)合肥國(guó)家大學(xué)科技園A401室

產(chǎn)品詳情

規(guī)格：500mL

儲(chǔ)存條件：基礎(chǔ)培養(yǎng)基2 ~ 8℃，添加劑-80 ~ -20℃；混勻后2 ~ 8℃，2周內(nèi)使用完畢。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

iPS細(xì)胞培養(yǎng)基是Delf技術(shù)股份有限公司開發(fā)出的一種適用于無飼養(yǎng)層培養(yǎng)、化學(xué)成分明確、并且不含動(dòng)物源蛋白的人多潛能干細(xì)胞（hESC/hiPSC）完全培養(yǎng)基。iPS細(xì)胞培養(yǎng)基是在James Thomson實(shí)驗(yàn)室開發(fā)的Essential 8培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，由Delf改良研發(fā)出的最新型多潛能干細(xì)胞完全培養(yǎng)基。hESC/hiPSC在iPS細(xì)胞培養(yǎng)基中可以快速增殖，而分化的細(xì)胞則無法在該培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，從而選擇性擴(kuò)增并獲得高純度多潛能干細(xì)胞。

產(chǎn)品內(nèi)容：

名稱	規(guī)格	數(shù)量
iPS細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基	500mL	1瓶
iPS細(xì)胞添加劑	20mL	1支

試劑準(zhǔn)備：

iPS細(xì)胞完全培養(yǎng)基：將iPS細(xì)胞添加劑加入iPS細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基中形成iPS細(xì)胞完全培養(yǎng)基（推薦每2mL添加劑與50mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基混合）。

iPS細(xì)胞完全培養(yǎng)基可在2-8℃穩(wěn)定儲(chǔ)存2-3周。

疑難解答：

?是否還需要往iPS細(xì)胞完全培養(yǎng)基中補(bǔ)充或添加成分？

不需要。iPS細(xì)胞培養(yǎng)基中各個(gè)成分的質(zhì)量和濃度都經(jīng)過了最優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，完全支持人ESC/iPSC的長(zhǎng)期培養(yǎng)，您無需再自行添加。

?培養(yǎng)基中有沉淀狀物質(zhì)是否是質(zhì)量問題？

添加劑在解凍過程中，若有少量沉淀析出，屬于正常現(xiàn)象，不影響使用，請(qǐng)充分混勻后與基礎(chǔ)培養(yǎng)基混合。但添加劑不能在37℃解凍，否則會(huì)析出大量沉淀，影響培養(yǎng)基的效價(jià)。如果培養(yǎng)基中出現(xiàn)大量沉淀，請(qǐng)不要使用。

?是否能在37 ℃反復(fù)水浴iPS細(xì)胞完全培養(yǎng)基？

不能。頻繁地在4℃和37℃之間轉(zhuǎn)換會(huì)導(dǎo)致iPS細(xì)胞完全培養(yǎng)基中含有的因子失活，iPS細(xì)胞完全培養(yǎng)基在使用前平衡至室溫即可。

? iPS細(xì)胞在傳代后不貼壁怎么解決？

造成iPS傳代后不貼壁的最可能的原因：

① 細(xì)胞消化時(shí)間不合適；②消化后吹打次數(shù)不合適，使得完成傳代后細(xì)胞集落過大或過小。

? iPS分化怎么處理？

①細(xì)胞在剛復(fù)蘇或傳代時(shí)，小的細(xì)胞團(tuán)不呈現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)的克隆形態(tài)，培養(yǎng)幾天或傳代后可恢復(fù)。②如果iPS分化的表現(xiàn)為干細(xì)胞克隆形態(tài)良好，克隆周邊出現(xiàn)散在的分化細(xì)胞，可通過高比例傳代（≥1:10），使得分化細(xì)胞的密度減少，低密度的分化細(xì)胞可被iPS培養(yǎng)體系篩選去除，如未完全去除，可用細(xì)胞刮或巴斯德管刮除。

③如果iPS分化的表現(xiàn)為克隆內(nèi)部松散，邊緣不平滑，在分化比例小或分化不嚴(yán)重的情況下，可通過連續(xù)傳代2 ~ 3次恢復(fù)，如果分化嚴(yán)重，建議棄除。

? 細(xì)胞復(fù)蘇率低是什么原因？

細(xì)胞復(fù)蘇需使用iPS細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)基，可大大提高細(xì)胞的復(fù)蘇效率。復(fù)蘇過程中，轉(zhuǎn)移細(xì)胞、吹打混勻和重懸細(xì)胞時(shí)，吹打力度要輕柔，并盡量減少吹打次數(shù)，細(xì)胞接種后，即刻在顯微鏡下觀察細(xì)胞團(tuán)塊的大小，4 ~ 10個(gè)細(xì)胞的團(tuán)塊為最佳。如果吹打力度過大或次數(shù)過多，

導(dǎo)致細(xì)胞分散成單細(xì)胞，細(xì)胞復(fù)蘇率將偏低。

常見問題

問：細(xì)胞的運(yùn)輸方式有哪些？有什么區(qū)別？

答：公司提供兩種運(yùn)輸方式供老師選擇，1、復(fù)蘇的活細(xì)胞：采用常溫發(fā)貨的方式，收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢(shì)是省去復(fù)蘇的步驟，細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞：采用干冰運(yùn)輸，一般情況下發(fā)貨是2支凍存管，收到后放-80過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮長(zhǎng)期存儲(chǔ)，擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢(shì)是發(fā)貨快，一般一兩天即可收到，缺點(diǎn)是需要自己復(fù)蘇。

問：為什么你們的細(xì)胞和其他公司的細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣？

答：我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息，如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺(tái)。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案，根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇！

問：培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復(fù)使用嗎？

答：不可以重復(fù)使用，一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出，充液的培養(yǎng)基血清比例會(huì)比正常培養(yǎng)時(shí)所用到的培養(yǎng)液低很多，通常在3-5%，以維持細(xì)胞存活，控制生長(zhǎng)速度，不可以用來做細(xì)胞培養(yǎng)使用。

問：培養(yǎng)細(xì)胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點(diǎn)是什么？

答：細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點(diǎn)點(diǎn)，一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物，懸浮細(xì)胞也會(huì)有這種現(xiàn)象，出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點(diǎn)。通常，白色的圓點(diǎn)是分散分布的，聚團(tuán)類的懸浮細(xì)胞可能會(huì)聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑，技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

問：剛買回來的細(xì)胞如何凍存留種呢？

答：一般情況下，我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種，可先凍存1-2支凍存管，凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些，便于后期復(fù)蘇。購買原代細(xì)胞的客戶，要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制，人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右，鼠源的可以傳3代左右，對(duì)于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞，不建議凍存，收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實(shí)驗(yàn)。