一、細(xì)胞簡(jiǎn)介

細(xì)胞簡(jiǎn)介

該細(xì)胞來(lái)源于人的正常外周血組織。

T淋巴細(xì)胞來(lái)源于骨髓的多能干細(xì)胞，骨髓中的一部分多能干細(xì)胞或前T細(xì)胞遷移到胸腺內(nèi)，在胸腺激素的誘導(dǎo)下分化成熟，成為具有免疫活性的T細(xì)胞。T細(xì)胞是相當(dāng)復(fù)雜的不均一體、又不斷在體內(nèi)更新、在同一時(shí)間可以存在不同發(fā)育階段或功能的亞群，按免疫應(yīng)答中的功能不同，可將T細(xì)胞分成若干亞群：輔助性T細(xì)胞（Helper T cells,Th）、抑制性T細(xì)胞（Suppressor T cells,Ts）、效應(yīng)T細(xì)胞（Effector T cells,Te）、細(xì)胞毒性T細(xì)胞（Cytotoxic T cells,Tc）、遲發(fā)性變態(tài)反應(yīng)T細(xì)胞（Delayed type hypersensitivityT cells,Td）、放大T細(xì)胞（Ta），、原始的或天然T細(xì)胞（Naive T cells）、記憶T細(xì)胞（Memory T cell,Tm）。

T細(xì)胞是淋巴細(xì)胞的主要組分，它具有多種生物學(xué)功能，如直接殺傷靶細(xì)胞，輔助或抑制B細(xì)胞產(chǎn)生抗體，對(duì)特異性抗原和促有絲分裂原的應(yīng)答反應(yīng)以及產(chǎn)生細(xì)胞因子等，T細(xì)胞產(chǎn)生的免疫應(yīng)答是細(xì)胞免疫，細(xì)胞免疫的效應(yīng)形式主要有兩種：與靶細(xì)胞特異性結(jié)合，破壞靶細(xì)胞膜，直接殺傷靶細(xì)胞；另一種是釋放淋巴因子，最終使免疫效應(yīng)擴(kuò)大和增強(qiáng)。

細(xì)胞名稱(chēng)

人CD4+T淋巴細(xì)胞

細(xì)胞別稱(chēng)

Human CD4+T lymphocytes

細(xì)胞貨號(hào)

Delf-16603

來(lái)源

人；正常外周血

細(xì)胞形態(tài)

淋巴細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性

懸浮生長(zhǎng)

培養(yǎng)條件

推薦使用DELF原代T淋巴細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)該細(xì)胞。

名稱(chēng)

體積

濃度

保存條件

原代T淋巴細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

500ml

1×

4℃、避光

原代T淋巴細(xì)胞培養(yǎng)添加劑

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清（FBS）

50ml

終濃度10%

-20℃、避光

雙抗（青霉素/鏈霉素，P/S）

5ml

100×

-20℃、避光

培養(yǎng)環(huán)境

氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

二、細(xì)胞復(fù)蘇方法

復(fù)蘇步驟

1、將凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍；
2、加入到含4-6mL完全培養(yǎng)基的離心管中混合均勻；
3、在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞；
4、將細(xì)胞懸液加入含6-8ml完全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)；

三、細(xì)胞傳代方法（懸浮細(xì)胞）

傳代比例

1:2（不同細(xì)胞情況具體對(duì)待）

傳代方法

1、當(dāng)細(xì)胞量達(dá)到 8-10×10⁵cell/ml 時(shí)，可進(jìn)行傳代；

2、在生物安全柜內(nèi)，打開(kāi)培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶?jī)?nèi)的細(xì)胞懸液至離心管中；

3、1000rpm 離心 5min，離心完成后，棄上清；

4、準(zhǔn)備兩個(gè)新的T-25 培養(yǎng)瓶。向細(xì)胞沉淀加入完全培養(yǎng)基重懸，調(diào)整細(xì)胞密度為2-4×10⁵cell/ml，均勻鋪于2個(gè)新的培養(yǎng)瓶中，每瓶約6-8ml；

5、水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO₂ 培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；

注意事項(xiàng)

注意收集懸浮的細(xì)胞

五、注意事項(xiàng)

注意事項(xiàng)

1、所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

2、建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意：凍存管浸沒(méi)在液氮中會(huì)泄漏，并會(huì)慢慢充滿液氮。解凍時(shí)，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。

3、本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動(dòng)物或人類(lèi)疾病的治療產(chǎn)品使用。