產(chǎn)品推薦
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產(chǎn)品詳情
一、產(chǎn)品描述
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別名 |
DIF; TNFA; TNFSF2; TNLG1F; TNF-alpha |
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蛋白及NCBI編號 |
P01375、NM_000594.4 |
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宿主 |
E.coli |
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表達區(qū)域 |
1-233aa |
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蛋白長度 |
全長蛋白(含標簽) |
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蛋白序列 |
MSTESMIRDVELAEEALPKKTGGPQGSRRCLFLSLFSFLIVAGA TTLFCLLHFGVIGPQREEFPRDLSLISPLAQAVRSSSRTPSDKPVAHVVANPQAEGQL QWLNRRANALLANGVELRDNQLVVPSEGLYLIYSQVLFKGQGCPSTHVLLTHTISRIA VSYQTKVNLLSAIKSPCQRETPEGAEAKPWYEPIYLGGVFQLEKGDRLSAEINRPDYL DFAESGQVYFGIIAL |
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分子量 |
約25.6kDa |
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融合標簽 |
6×His-SUMO (N端) |
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純度 |
≥95% 蛋白電泳 |
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物理性狀 |
液態(tài)或凍干粉 |
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復(fù)溶 |
儲存液:推薦用PBS或者根據(jù)實驗需要選定合適溶劑配成1mg/mL儲存液,分裝保存于-20℃。 工作液:客戶可根據(jù)實驗要求稀釋,現(xiàn)配現(xiàn)用。工作液配置后可以4℃放置2-3周。 |
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穩(wěn)定性 |
在-20℃/-80℃條件下,液態(tài)產(chǎn)品保存6個月,凍干產(chǎn)品保存12個月。 |
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應(yīng)用 |
抗體制備,免疫實驗(ELISA,WB),亞細胞定位和互作蛋白鑒定等。 |
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發(fā)貨周期 |
1-2周,現(xiàn)貨2-3天。 |
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實驗效果圖
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Bis-Tris (MOPS) SDS-PAGE蛋白電泳圖 |
二 、運輸和儲存
2-8℃運輸。從收到之日起,在-20℃至-80℃的無菌條件下保存。
三、背景信息TNF-α基因編碼一種多功能促炎細胞因子,屬于腫瘤壞死因子超家族成員。主要由巨噬細胞分泌,與腫瘤壞死因子受體結(jié)合而發(fā)揮功能。腫瘤壞死因子和腫瘤壞死因子受體超家族蛋白(TNFR SFP),是一組配體-受體蛋白超家族。TNF含有一個稱為腫瘤壞死因子同源結(jié)構(gòu)域(THD)的三聚體對稱結(jié)構(gòu)基序,此結(jié)構(gòu)域能與TNF受體(TNFRs)中富含半胱氨酸的構(gòu)域(CRDs) 結(jié)合,CRDs的多樣性導(dǎo)致TNFRs的異質(zhì)性。
TNF-α的活性是通過其兩種受體TNF-R1(p55)和TNF-R2(p75)介導(dǎo)的,它們的信號傳導(dǎo)活性不同。TNF-R1通常是促凋亡的,而TNF-R2 通常是抗細胞凋亡。TNF-R1和TNF-R2具有相似的細胞外TNF結(jié)合結(jié)構(gòu),其特征在于四個重復(fù)的富含半胱氨酸的結(jié)構(gòu)域,但具有不同的細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域。TNF-R和TNF-R2之間的主要結(jié)構(gòu)差異導(dǎo)致其生物活性的差異,其主要原因在于TNF-R2缺乏細胞內(nèi)死亡域。
TNF-α具有多效性,TNF-α已被證實可調(diào)節(jié)多種炎癥和自身免疫過程。低水平的TNF-α可調(diào)節(jié) 機體免疫反應(yīng)起到抗感染的作用,高水平的TNF-α又會誘導(dǎo)其他炎癥因子如 IL-1、IL-6、IL-8、IL-10、 IL-12等的分泌,促進體內(nèi)炎癥反應(yīng)。TNF-α可通過促進T細胞增殖、損傷血管內(nèi)皮細胞等作用殺傷腫瘤,也可通過募集免疫細胞、誘導(dǎo)產(chǎn)生前列腺素和環(huán)氧合酶、誘導(dǎo)氧化應(yīng)激等途徑促進細胞變性與炎癥進展。
四、參考文獻
1. Torrey Heather,Butterworth John,Mera Toshiyuki,Okubo Yoshiaki,Wang Limei,Baum Danielle,Defusco Audrey,Plager Sara,Warden Sarah,Huang Daniel,Vanamee Eva,Foster Rosemary,Faustman Denise L. Targeting TNFR2 with antagonistic antibodies inhibits proliferation of ovarian cancer cells and tumor-associated Tregs. Sci Signal. 2017;10(462):eaaf8608.
2. Park Young-Hoon,Jeong Mi Suk,Jang Se Bok. Structural insights of homotypic interaction domains in the ligand-receptor signal transduction of tumor necrosis factor (TNF). BMB Rep. 2016 Mar;49(3):159-66.
3. Jongseok Lee, Jami L. Saloman,Gustave Weiland,Q-Schick Auh,Man-Kyo Chung,Jin Y. Ro. Functional interactions between NMDA receptors and TRPV1 in trigeminal sensory neurons mediate mechanical hyperalgesia in the rat masseter muscle. Pain. 2012 Jul;153(7):1514-1524.
4. Lucía Cabal-Hierro,Pedro S. Lazo. Signal transduction by tumor necrosis factor receptors. Cell Signal. 2012 Jun;24(6):1297-305.
5. 郭悅承,陸倫根. 腫瘤壞死因子-α在非酒精性脂肪性肝病進展中的作用. 胃腸病學(xué),2019,24(10):623-626.
6. AGGARWAL,NATARAJAN B B K. Tumor necrosis factors: Developments during the last decade. Eur Cytokine Netw, 1996,7(2):93-124.
常見問題
答:公司提供兩種運輸方式供老師選擇,1、復(fù)蘇的活細胞:采用常溫發(fā)貨的方式,收到即可觀察密度并判斷是否進行傳代操作。優(yōu)勢是省去復(fù)蘇的步驟,細胞成活率較高。2、凍存的細胞:采用干冰運輸,一般情況下發(fā)貨是2支凍存管,收到后放-80過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲,擇機復(fù)蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快,一般一兩天即可收到,缺點是需要自己復(fù)蘇。
答:我公司提供的細胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息,如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案,根據(jù)客戶的意愿進行選擇!
答:不可以重復(fù)使用,一般從我公司發(fā)出的細胞都需要達到一定的密度后發(fā)出,充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多,通常在3-5%,以維持細胞存活,控制生長速度,不可以用來做細胞培養(yǎng)使用。
答:細胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點點,一般情況下是為貼壁的細胞或脫落的細胞死亡后的產(chǎn)物,懸浮細胞也會有這種現(xiàn)象,出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點。通常,白色的圓點是分散分布的,聚團類的懸浮細胞可能會聚團出現(xiàn)白色的亮斑,技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。
答:一般情況下,我公司建議客戶收到細胞后傳1-2代后即可安排凍存留種,可先凍存1-2支凍存管,凍存的細胞數(shù)量多一些,便于后期復(fù)蘇。購買原代細胞的客戶,要充分考慮該細胞的傳代次數(shù)限制,人源原代細胞大概可以傳7代左右,鼠源的可以傳3代左右,對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細胞,不建議凍存,收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實驗。



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