TTC染色
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一鍵復(fù)制產(chǎn)品信息
產(chǎn)品推薦
聯(lián)系方式
- 電話:400-1016-218
- 郵箱:355185756@qq.com
- 地址:安徽省合肥市高新區(qū)黃山路602號合肥國家大學(xué)科技園A401室
產(chǎn)品詳情
服務(wù)介紹:
2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC),分子量為334.80,分子式為C19H15CIN4,CAS號為298-96-4,TTC是脂溶性光敏感復(fù)合物,最初用于檢測種子生存能力,后來用于染色檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。
實驗原理:
TTC是呼吸鏈中吡啶核苷結(jié)合酶系統(tǒng)的質(zhì)子受體,由于各種脫氫酶的活性,白色化合物在活組織中被酶促還原為紅色TPF(1,3,5-三苯基甲臜),而在壞死區(qū)域,這些酶已經(jīng)變性或降解,因此在壞死區(qū)域保持白色,該染色是一種用于評價組織內(nèi)脫氫酶活性的大體染色方法。
實驗步驟
1、取材:動物麻醉后立即取新鮮組織(如腦、心臟),不經(jīng)固定液固定,將組織直接放入OCT包埋劑-20℃速凍30min,如果不急用,可以暫時放置-80℃凍存。
2、組織塊切片:將凍好的組織稍解凍,用萊卡新刀片手動切片,厚度2-3mm為宜,切面整齊。
3、TTC染色:將切片放入提前37℃預(yù)熱好的的TTC孵育液中,放入37℃水浴鍋中避光孵育 30min,間隔10min輕輕搖動組織,使其均勻接觸到染色液,并觀察染色結(jié)果。
4、拍照:組織成色后,加入固定液終止反應(yīng),并避光保存組織,照相機(jī)拍照。
送樣運輸要求:
新鮮組織, -80℃運輸
常見問題
答:公司提供兩種運輸方式供老師選擇,1、復(fù)蘇的活細(xì)胞:采用常溫發(fā)貨的方式,收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢是省去復(fù)蘇的步驟,細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞:采用干冰運輸,一般情況下發(fā)貨是2支凍存管,收到后放-80過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲,擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快,一般一兩天即可收到,缺點是需要自己復(fù)蘇。
答:我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息,如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案,根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇!
答:不可以重復(fù)使用,一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出,充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多,通常在3-5%,以維持細(xì)胞存活,控制生長速度,不可以用來做細(xì)胞培養(yǎng)使用。
答:細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點點,一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物,懸浮細(xì)胞也會有這種現(xiàn)象,出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點。通常,白色的圓點是分散分布的,聚團(tuán)類的懸浮細(xì)胞可能會聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑,技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。
答:一般情況下,我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種,可先凍存1-2支凍存管,凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些,便于后期復(fù)蘇。購買原代細(xì)胞的客戶,要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制,人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右,鼠源的可以傳3代左右,對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞,不建議凍存,收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實驗。













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