當(dāng)前位置：首頁 > 產(chǎn)品中心 > 技術(shù)服務(wù) > 分子檢測 > shRNA 篩靶套餐

shRNA 篩靶套餐

shRNA 篩靶套餐，針對不同靶點(diǎn)設(shè)計(jì)的shRNA敲降效果往往不同，所以，在進(jìn)行RNA干擾實(shí)驗(yàn)之前，有必要進(jìn)行有效shRNA的篩選，在3-5條shRNA中篩選1-2條干擾效率最高的shRNA，以進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。若293等工具細(xì)胞中有目的基因高表達(dá)，則可直接導(dǎo)入shRNA表達(dá)載體進(jìn)行篩選。而如果293等細(xì)胞中目的基因表達(dá)量低，則需要額外共轉(zhuǎn)染一個(gè)目的基因的過表達(dá)載體，人為地創(chuàng)造一個(gè)目的基因高表達(dá)環(huán)境，以便于shRNA的篩選......

折扣咨詢在線咨詢

產(chǎn)品推薦

聯(lián)系方式

電話：
400-1016-218
郵箱：
355185756@qq.com
地址：
安徽省合肥市高新區(qū)黃山路602號合肥國家大學(xué)科技園A401室

產(chǎn)品詳情

針對不同靶點(diǎn)設(shè)計(jì)的shRNA敲降效果往往不同，所以，在進(jìn)行RNA干擾實(shí)驗(yàn)之前，有必要進(jìn)行有效shRNA的篩選，在3-5條shRNA中篩選1-2條干擾效率最高的shRNA ，以進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

若293等工具細(xì)胞中有目的基因高表達(dá)，則可直接導(dǎo)入shRNA表達(dá)載體進(jìn)行篩選。而如果293等細(xì)胞中目的基因表達(dá)量低，則需要額外共轉(zhuǎn)染一個(gè)目的基因的過表達(dá)載體，人為地創(chuàng)造一個(gè)目的基因高表達(dá)環(huán)境，以便于shRNA的篩選和驗(yàn)證。

實(shí)驗(yàn)流程圖

我們的優(yōu)勢：

1.高環(huán)評、標(biāo)準(zhǔn)化、開放式實(shí)驗(yàn)室，客戶可全程跟蹤實(shí)驗(yàn)；

2.標(biāo)準(zhǔn)的SOP操作規(guī)程，確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)、客觀、可靠！

服務(wù)周期:

1、預(yù)實(shí)驗(yàn)293 等工具細(xì)胞中目的基因表達(dá)量 5工作日

2、shRNA 表達(dá)載體構(gòu)建(默認(rèn)為三條) 10-15工作日

3、轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒大提( 100 μg) 5工作日

4、細(xì)胞培養(yǎng) 5工作日

5、細(xì)胞轉(zhuǎn)染 5工作日

6、qPCR 檢測 5工作日

7、數(shù)據(jù)分析 3-5工作日

樣本郵寄要求

1.復(fù)蘇細(xì)胞：不透氣T25方瓶，常溫；

2.凍存細(xì)胞：純干冰件，保證干冰充足；

3.質(zhì)粒、miRNA等-20℃寄送。

交付標(biāo)準(zhǔn)：

1.完整實(shí)驗(yàn)報(bào)告一份（包括所用到試劑耗材、儀器設(shè)備、操作步驟、原始數(shù)據(jù)和實(shí)驗(yàn)分析結(jié)果）。

2.剩余的樣本和試劑。

常見問題

問：細(xì)胞的運(yùn)輸方式有哪些？有什么區(qū)別？

答：公司提供兩種運(yùn)輸方式供老師選擇，1、復(fù)蘇的活細(xì)胞：采用常溫發(fā)貨的方式，收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢是省去復(fù)蘇的步驟，細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞：采用干冰運(yùn)輸，一般情況下發(fā)貨是2支凍存管，收到后放-80過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲(chǔ)，擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快，一般一兩天即可收到，缺點(diǎn)是需要自己復(fù)蘇。

問：為什么你們的細(xì)胞和其他公司的細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣？

答：我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息，如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺(tái)。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案，根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇！

問：培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復(fù)使用嗎？

答：不可以重復(fù)使用，一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出，充液的培養(yǎng)基血清比例會(huì)比正常培養(yǎng)時(shí)所用到的培養(yǎng)液低很多，通常在3-5%，以維持細(xì)胞存活，控制生長速度，不可以用來做細(xì)胞培養(yǎng)使用。

問：培養(yǎng)細(xì)胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點(diǎn)是什么？

答：細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點(diǎn)點(diǎn)，一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物，懸浮細(xì)胞也會(huì)有這種現(xiàn)象，出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點(diǎn)。通常，白色的圓點(diǎn)是分散分布的，聚團(tuán)類的懸浮細(xì)胞可能會(huì)聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑，技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

問：剛買回來的細(xì)胞如何凍存留種呢？

答：一般情況下，我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種，可先凍存1-2支凍存管，凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些，便于后期復(fù)蘇。購買原代細(xì)胞的客戶，要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制，人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右，鼠源的可以傳3代左右，對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞，不建議凍存，收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實(shí)驗(yàn)。