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      產(chǎn)品詳情

      立即穩(wěn)定和保護(hù)RNA
      可靠的基因表達(dá)和分析數(shù)據(jù)
      室溫下操作方便安全
      無(wú)需使用液氮或干冰

      可長(zhǎng)期保存組織,無(wú)RNA降解風(fēng)險(xiǎn)

      切除大鼠組織(各10 mg),置于磷酸鹽緩沖液(PBS)或RNAlater RNA Stabilization Reagent(RNAlater)中,室溫下保存至多4個(gè)小時(shí)。在指定時(shí)間,使用RNeasy Protect Mini Kit分離RNA。使用QuantiTect Probe RT-PCR Kit和針對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)基因或腫瘤壞死因子α(TNF-α)基因的特異性引物和探針,及總RNA進(jìn)行定量RT-PCR。在ABI PRISM 7700 Sequence Detection System上進(jìn)行三次重復(fù)分析。
      Performance
      RNAlater Stabilization Reagent可穩(wěn)定和保護(hù)在收集和儲(chǔ)存樣本時(shí)的RNA表達(dá)譜(參見(jiàn)"RNAlater Reagent prevents degradation of mRNA in tissues")。RNAlater技術(shù)對(duì)RNA的立即保護(hù),可確保下游分析真實(shí)地反映整個(gè)組織的表達(dá)譜(參見(jiàn)"RNAlater TissueProtect Tubes prevent RNA changes in tissues")。樣本可長(zhǎng)期保存,無(wú)RNA降解風(fēng)險(xiǎn),甚至經(jīng)多次凍融后也無(wú)影響。在從多種條件下保存的RNAlater穩(wěn)定樣本中純化得到的RNA,適用于northern印跡和RT-PCR等下游應(yīng)用(參見(jiàn)"Stable RNA in tissues: different temperatures and freeze–thaw cycles")。
      Principle
      一旦生物樣本被收集后,其RNA會(huì)變得極不穩(wěn)定。創(chuàng)新的液狀RNAlater RNA Stabilization Reagent可快速滲入組織樣本,立即穩(wěn)定RNA,保護(hù)RNA表達(dá)模式。還能避免樣本處理導(dǎo)致的基因誘導(dǎo)或下調(diào),可進(jìn)行準(zhǔn)確的基因表達(dá)分析。
      Procedure
      組織樣本收集后,迅速浸入適當(dāng)體積的RNAlater RNA Stabilization Reagent中,即可保護(hù)RNA和儲(chǔ)存樣本。用可重復(fù)密封的管子,RNAlaterTissueProtect Tubes可預(yù)先測(cè)定所需RNAlater RNA Stabilization Reagent的體積,方便操作和樣本保存。該試劑可使RNA在37°C下保存1天,18–25°C下保存7天,2–8°C下保存4周,并且可以在無(wú)液氮或干冰條件下處理、運(yùn)輸和儲(chǔ)存樣本。另外,樣本可以在–20°C或–80°C條件下存檔。
      Applications
      使用RNAlater RNA Stabilization Reagent穩(wěn)定后的動(dòng)物和人體組織樣本,可用QIAGEN儀器進(jìn)行高效的樣本破碎,并配合QIAGEN試劑盒用于:
      總RNA純化
      miRNA純化
      mRNA純化



      常見(jiàn)問(wèn)題
      問(wèn):細(xì)胞的運(yùn)輸方式有哪些?有什么區(qū)別?

      答:公司提供兩種運(yùn)輸方式供老師選擇,1、復(fù)蘇的活細(xì)胞:采用常溫發(fā)貨的方式,收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢(shì)是省去復(fù)蘇的步驟,細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞:采用干冰運(yùn)輸,一般情況下發(fā)貨是2支凍存管,收到后放-80過(guò)夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮長(zhǎng)期存儲(chǔ),擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢(shì)是發(fā)貨快,一般一兩天即可收到,缺點(diǎn)是需要自己復(fù)蘇。

      問(wèn):為什么你們的細(xì)胞和其他公司的細(xì)胞培養(yǎng)條件不一樣?

      答:我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫(kù)的培養(yǎng)信息,如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺(tái)。也有少部分細(xì)胞為客戶(hù)提供了替代培養(yǎng)方案,根據(jù)客戶(hù)的意愿進(jìn)行選擇!

      問(wèn):培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復(fù)使用嗎?

      答:不可以重復(fù)使用,一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出,充液的培養(yǎng)基血清比例會(huì)比正常培養(yǎng)時(shí)所用到的培養(yǎng)液低很多,通常在3-5%,以維持細(xì)胞存活,控制生長(zhǎng)速度,不可以用來(lái)做細(xì)胞培養(yǎng)使用。

      問(wèn):培養(yǎng)細(xì)胞在鏡下觀察發(fā)現(xiàn)有一些白色的圓點(diǎn)是什么?

      答:細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點(diǎn)點(diǎn),一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物,懸浮細(xì)胞也會(huì)有這種現(xiàn)象,出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點(diǎn)。通常,白色的圓點(diǎn)是分散分布的,聚團(tuán)類(lèi)的懸浮細(xì)胞可能會(huì)聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑,技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

      問(wèn):剛買(mǎi)回來(lái)的細(xì)胞如何凍存留種呢?

      答:一般情況下,我公司建議客戶(hù)收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種,可先凍存1-2支凍存管,凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些,便于后期復(fù)蘇。購(gòu)買(mǎi)原代細(xì)胞的客戶(hù),要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制,人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右,鼠源的可以傳3代左右,對(duì)于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞,不建議凍存,收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實(shí)驗(yàn)。

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