植物木栓質(zhì)FY染色
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產(chǎn)品詳情
服務(wù)介紹
木栓質(zhì)suberin是細(xì)胞壁發(fā)生栓質(zhì)化時壁中堆積的物質(zhì),其化學(xué)本質(zhì)是由甘油、脂肪酸與酚類化合物形成的高分子雜聚物。
木栓質(zhì)主要分布于植物根內(nèi)皮層、外皮層,其中內(nèi)皮層木栓質(zhì)的沉積在所有高等植物中廣泛存在,且形成較早,可以隔離皮層和中柱組織。其次,木栓質(zhì)也存在于周皮組織。此外在傷口愈合的過程中,在傷口邊緣處也會沉積木栓質(zhì)以保護(hù)健康組織。換句話說,木栓化的周皮沉積與植物-環(huán)境界面,起到保護(hù)植物內(nèi)部組織的作用。木栓質(zhì)還沉積于組織-組織界面,使植物內(nèi)部各組織間相互隔離。例如柑橘屬植物種皮的合點(diǎn)及珠孔區(qū)域。另外,外界環(huán)境(例如鹽脅迫、重金屬脅迫等脅迫環(huán)境)刺激也可誘導(dǎo)木栓質(zhì)的沉積。簡單來說,木栓質(zhì)對于植物而言是一種保護(hù)屏障。
本染色采用熒光黃088(Fluorol Yellow 088)對木栓質(zhì)進(jìn)行染色。熒光黃088是一種多環(huán)芳烴有機(jī)染料,是一種較好的親脂性熒光素,可與植物的脂質(zhì)結(jié)合,多用于植物組織木栓質(zhì)層的細(xì)胞染色,與木栓質(zhì)結(jié)合后呈綠色熒光。
實(shí)驗流程
組織切片脫蠟復(fù)水-FY染色-苯胺藍(lán)染色-封片-熒光顯微鏡觀察
結(jié)果解讀
木栓質(zhì)層細(xì)胞呈綠色熒光。采集圖片時一般進(jìn)行多通道熒光拍照,最后疊加多通道熒光信號,此時木栓質(zhì)層顯示黃色熒光。
樣本準(zhǔn)備
1、植物根、莖、葉等,經(jīng)FAA或卡諾氏固定液固定24h以上,常溫運(yùn)輸。冬季氣溫低時避免結(jié)冰。
2、石蠟切片常溫運(yùn)輸。
常見問題
答:公司提供兩種運(yùn)輸方式供老師選擇,1、復(fù)蘇的活細(xì)胞:采用常溫發(fā)貨的方式,收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢是省去復(fù)蘇的步驟,細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞:采用干冰運(yùn)輸,一般情況下發(fā)貨是2支凍存管,收到后放-80過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲,擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快,一般一兩天即可收到,缺點(diǎn)是需要自己復(fù)蘇。
答:我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息,如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案,根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇!
答:不可以重復(fù)使用,一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出,充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多,通常在3-5%,以維持細(xì)胞存活,控制生長速度,不可以用來做細(xì)胞培養(yǎng)使用。
答:細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點(diǎn)點(diǎn),一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物,懸浮細(xì)胞也會有這種現(xiàn)象,出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點(diǎn)。通常,白色的圓點(diǎn)是分散分布的,聚團(tuán)類的懸浮細(xì)胞可能會聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑,技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。
答:一般情況下,我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種,可先凍存1-2支凍存管,凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些,便于后期復(fù)蘇。購買原代細(xì)胞的客戶,要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制,人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右,鼠源的可以傳3代左右,對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞,不建議凍存,收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實(shí)驗。














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