探針設(shè)計合成-4OD(一端標(biāo)記、FAM)
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¥ 0.00
一鍵復(fù)制產(chǎn)品信息
產(chǎn)品推薦
聯(lián)系方式
- 電話:400-1016-218
- 郵箱:355185756@qq.com
- 地址:安徽省合肥市高新區(qū)黃山路602號合肥國家大學(xué)科技園A401室
產(chǎn)品詳情
服務(wù)介紹:
根據(jù)提供的基因序列,采用寡核苷酸設(shè)計軟件,設(shè)計出候補探針序列,經(jīng)數(shù)據(jù)庫比對后,判斷特異性合格后,按序列合成出對應(yīng)的核酸序列并標(biāo)記特定的標(biāo)記物.
以上探針為cDNA寡核苷酸探針,若合成RNA額外增加1000元。
實驗流程:
1、設(shè)計:設(shè)計具有特異性的探針序列
2、合成:采用固相亞磷酰胺三酯法,經(jīng)過四步循環(huán)反應(yīng):脫保護(hù)、耦連、加帽、氧化,逐一將一個一個核苷酸單體連接在3’固相載體上,在過程中將修飾標(biāo)記在相應(yīng)位置。
3、氨解:將合成好的寡聚核苷酸從固體載體(CPG)上化學(xué)切割下來,經(jīng)氨解脫去保護(hù)基團(tuán)。
4、純化:粗品質(zhì)檢合格后,對粗品進(jìn)行HPLC純化,通過分離度不同分離雜質(zhì),制備出目標(biāo)產(chǎn)物純品。
5、質(zhì)檢:利用LTQ-MS質(zhì)譜儀對目標(biāo)產(chǎn)物純品進(jìn)行檢測。
6、定量分裝:利用酶標(biāo)儀對合格純品進(jìn)行A260定量分裝,然后用真空干燥機(jī)抽干樣品至呈干粉狀。
送樣運輸要求:干粉狀態(tài)4度運輸。液體狀態(tài)-20度運輸
常見問題
答:公司提供兩種運輸方式供老師選擇,1、復(fù)蘇的活細(xì)胞:采用常溫發(fā)貨的方式,收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢是省去復(fù)蘇的步驟,細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞:采用干冰運輸,一般情況下發(fā)貨是2支凍存管,收到后放-80過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲,擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快,一般一兩天即可收到,缺點是需要自己復(fù)蘇。
答:我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息,如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案,根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇!
答:不可以重復(fù)使用,一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出,充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多,通常在3-5%,以維持細(xì)胞存活,控制生長速度,不可以用來做細(xì)胞培養(yǎng)使用。
答:細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點點,一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物,懸浮細(xì)胞也會有這種現(xiàn)象,出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點。通常,白色的圓點是分散分布的,聚團(tuán)類的懸浮細(xì)胞可能會聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑,技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。
答:一般情況下,我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種,可先凍存1-2支凍存管,凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些,便于后期復(fù)蘇。購買原代細(xì)胞的客戶,要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制,人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右,鼠源的可以傳3代左右,對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞,不建議凍存,收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實驗。













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