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探針設計合成-2OD（兩端標記、CY5）

探針設計合成-2OD（兩端標記、CY5），服務介紹：根據提供的基因序列，采用寡核苷酸設計軟件，設計出候補探針序列，經數據庫比對后，判斷特異性合格后，按序列合成出對應的核酸序列并標記特定的標記物.以上探針為cDNA寡核苷酸探針，若合成RNA額外增加1000元。實驗流程：1、設計：設計具有特異性的探針序列2、合成：采用固相亞磷酰胺三酯法，經過四步循環(huán)反應：脫保護、耦連、加帽、氧化，逐一將一個一個核苷酸單體連接在3’固相載體上,在過程中將修飾標......

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產品詳情

服務介紹：

根據提供的基因序列，采用寡核苷酸設計軟件，設計出候補探針序列，經數據庫比對后，判斷特異性合格后，按序列合成出對應的核酸序列并標記特定的標記物.

以上探針為cDNA寡核苷酸探針，若合成RNA額外增加1000元。

實驗流程：

1、設計：設計具有特異性的探針序列

2、合成：采用固相亞磷酰胺三酯法，經過四步循環(huán)反應：脫保護、耦連、加帽、氧化，逐一將一個一個核苷酸單體連接在3’固相載體上,在過程中將修飾標記在相應位置。

3、氨解：將合成好的寡聚核苷酸從固體載體(CPG)上化學切割下來，經氨解脫去保護基團。

4、純化：粗品質檢合格后，對粗品進行HPLC純化，通過分離度不同分離雜質，制備出目標產物純品。

5、質檢：利用LTQ-MS質譜儀對目標產物純品進行檢測。

6、定量分裝：利用酶標儀對合格純品進行A260定量分裝，然后用真空干燥機抽干樣品至呈干粉狀。

送樣運輸要求：干粉狀態(tài)4度運輸。液體狀態(tài)-20度運輸

常見問題

問：細胞的運輸方式有哪些？有什么區(qū)別？

答：公司提供兩種運輸方式供老師選擇，1、復蘇的活細胞：采用常溫發(fā)貨的方式，收到即可觀察密度并判斷是否進行傳代操作。優(yōu)勢是省去復蘇的步驟，細胞成活率較高。2、凍存的細胞：采用干冰運輸，一般情況下發(fā)貨是2支凍存管，收到后放-80過夜，第二天轉入液氮長期存儲，擇機復蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快，一般一兩天即可收到，缺點是需要自己復蘇。

問：為什么你們的細胞和其他公司的細胞培養(yǎng)條件不一樣？

答：我公司提供的細胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息，如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案，根據客戶的意愿進行選擇！

問：培養(yǎng)瓶的培養(yǎng)液可以重復使用嗎？

答：不可以重復使用，一般從我公司發(fā)出的細胞都需要達到一定的密度后發(fā)出，充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多，通常在3-5%，以維持細胞存活，控制生長速度，不可以用來做細胞培養(yǎng)使用。

問：培養(yǎng)細胞在鏡下觀察發(fā)現有一些白色的圓點是什么？

答：細胞在鏡下發(fā)現圓形的白色的點點，一般情況下是為貼壁的細胞或脫落的細胞死亡后的產物，懸浮細胞也會有這種現象，出現圓形的光圈一樣的圓點。通常，白色的圓點是分散分布的，聚團類的懸浮細胞可能會聚團出現白色的亮斑，技術老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。

問：剛買回來的細胞如何凍存留種呢？

答：一般情況下，我公司建議客戶收到細胞后傳1-2代后即可安排凍存留種，可先凍存1-2支凍存管，凍存的細胞數量多一些，便于后期復蘇。購買原代細胞的客戶，要充分考慮該細胞的傳代次數限制，人源原代細胞大概可以傳7代左右，鼠源的可以傳3代左右，對于一些能傳代次數很少的原代細胞，不建議凍存，收到后調整狀態(tài)后即可安排實驗。