大鼠皮膚損傷模型
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皮膚損傷模型:皮膚創(chuàng)傷一般指皮膚受到各種因素的作用下所造成的皮膚組織破壞及可能發(fā)生的全身反應(yīng)。急性皮膚創(chuàng)傷模型通常由手術(shù)以及一些物理化學(xué)因素所致傷害造成的,具有造模速度快、創(chuàng)傷原因明確,愈合過(guò)程較快的特點(diǎn),廣泛應(yīng)用于創(chuàng)傷研究中。
實(shí)驗(yàn)流程:
1、前期溝通:接收客戶方案并審核可行性;
2、實(shí)驗(yàn)步驟:動(dòng)物麻醉-皮膚切除損傷手術(shù)造模--縫合傷口-補(bǔ)充生理鹽水并動(dòng)物-保溫
3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:實(shí)驗(yàn)報(bào)告
實(shí)驗(yàn)前1周實(shí)驗(yàn)室喂養(yǎng),實(shí)驗(yàn)當(dāng)天禁食, 3%wu巴bi妥鈉,30mg腹腔內(nèi)注射麻醉,以8%liu化鈉在實(shí)驗(yàn)鼠背部?jī)裘?面
積9cmx!8cm,然后用特制致傷器(打孔器)在背中部脊柱兩側(cè)旁開(kāi)1. 5cm,共切割4個(gè)圓形潰瘍,直徑1. 8cm.面積2.54
cm深至皮下,止血后備用。用病理學(xué)組織檢測(cè),分析統(tǒng)計(jì)數(shù)值。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的抓取固定方法
1. 小白鼠 小白鼠較溫和,一般不會(huì)咬人,不需要戴手套捕捉,先用右手抓住鼠尾提起,置于鼠籠或?qū)嶒?yàn)臺(tái)上,用左手的拇指、食指和中指抓住小鼠兩耳后項(xiàng)背部皮毛,以無(wú)名指及小指夾住鼠尾即可。
2. 大白鼠 大白鼠牙齒鋒利,捕捉時(shí)要提防被咬傷。從籠內(nèi)抓取周齡較小的大白鼠時(shí),需抓住大白鼠尾巴的根部,不要讓大白鼠懸在空中的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),否則易激怒大白鼠并易致尾部皮膚脫落,抓取大的時(shí),用左手從背部中央到胸部捏住,但用力不宜過(guò)大,最好戴防護(hù)手套,但手套不宜過(guò)厚。
如若是灌胃、腹腔注射、肌肉或皮下注射,可采用抓取小鼠的手法,調(diào)整好大鼠在手中的姿勢(shì)后即可操作。
如須進(jìn)行尾靜脈取血或注射時(shí),可按小白鼠尾靜脈注射法將大鼠固定于固定器內(nèi)或置于倒扣的燒杯中,將鼠尾留在外面進(jìn)行操作。
3. 家兔 家兔易于馴服,一般不會(huì)咬人,但腳爪較銳利。抓取時(shí)切記忌強(qiáng)抓兔的耳朵、腰部或四肢。當(dāng)兔在籠內(nèi)安靜下來(lái)時(shí),打開(kāi)籠門(mén),用右手抓住頸部的被毛和皮膚,輕輕把動(dòng)物提起,把兔拉至籠門(mén)口,頭朝外,然后迅速用左手托起兔的臀部,給家兔以舒適安全感。按實(shí)驗(yàn)要求,可采取用手、兔臺(tái)或兔盒固定。
(1)用手固定:如須經(jīng)口給藥時(shí),則應(yīng)坐在椅上用一只手抓住兔頸背皮膚,另一只手抓住兩后肢挾在大腿之間。大腿挾住兔的下半身,用空著的手抓住兩前肢將兔固定。抓住頸背部的手,同時(shí)捏著兩個(gè)耳朵,不讓其頭部活動(dòng),即可操作。
(2)兔臺(tái)固定:如需進(jìn)行頸、胸、腹部手術(shù)或需要觀察呼吸、血壓時(shí)應(yīng)在麻醉后綁好四肢(后肢應(yīng)系在踝關(guān)節(jié)以上,前肢應(yīng)系在腕關(guān)節(jié)以上),然后使其仰臥位固定在兔臺(tái)上。
(3)兔盒固定:如僅須做耳緣靜脈注射或取血,可使用兔盒固定。
4. 狗 實(shí)驗(yàn)第一個(gè)步驟就是封好狗嘴,要提防被咬。對(duì)于馴服的狗,可以從側(cè)面靠近輕輕撫摸其項(xiàng)背部皮毛,然后用固定帶迅速綁住其嘴,在上頜打一個(gè)結(jié),再繞回下頜打第二個(gè)結(jié),然后引至后頸項(xiàng)部打第三個(gè)結(jié)。對(duì)于未經(jīng)馴服的狗,可使用狗頭鉗夾住其頸部,將狗按倒在地,再綁其嘴或靜脈麻醉后再移去狗頭鉗。最后把狗放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,先固定頭部,再固定四肢(與家兔固定法相同)。
做慢性實(shí)驗(yàn)時(shí),實(shí)驗(yàn)者若每日親自喂飼,逐漸馴服,在實(shí)驗(yàn)時(shí)可達(dá)到充分合作的目的。對(duì)于一些無(wú)刺激、無(wú)疼痛的實(shí)驗(yàn),狗也會(huì)服從、配合。
5. 蛙類(lèi) 在捉拿蟾蜍時(shí)勿碰壓耳側(cè)的毒腺,提防毒液射入眼中。用左手將蛙握住,以中指、無(wú)名指和小指壓住其左腹側(cè)和后肢,拇指和食指分別壓住右、左前肢,右手進(jìn)行操作。也可用固定釘將蛙固定在蛙板上。
僅供科研用途,不可用于臨床診斷!
常見(jiàn)問(wèn)題
答:公司提供兩種運(yùn)輸方式供老師選擇,1、復(fù)蘇的活細(xì)胞:采用常溫發(fā)貨的方式,收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢(shì)是省去復(fù)蘇的步驟,細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞:采用干冰運(yùn)輸,一般情況下發(fā)貨是2支凍存管,收到后放-80過(guò)夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮長(zhǎng)期存儲(chǔ),擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢(shì)是發(fā)貨快,一般一兩天即可收到,缺點(diǎn)是需要自己復(fù)蘇。
答:我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫(kù)的培養(yǎng)信息,如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺(tái)。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案,根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇!
答:不可以重復(fù)使用,一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出,充液的培養(yǎng)基血清比例會(huì)比正常培養(yǎng)時(shí)所用到的培養(yǎng)液低很多,通常在3-5%,以維持細(xì)胞存活,控制生長(zhǎng)速度,不可以用來(lái)做細(xì)胞培養(yǎng)使用。
答:細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點(diǎn)點(diǎn),一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物,懸浮細(xì)胞也會(huì)有這種現(xiàn)象,出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點(diǎn)。通常,白色的圓點(diǎn)是分散分布的,聚團(tuán)類(lèi)的懸浮細(xì)胞可能會(huì)聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑,技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。
答:一般情況下,我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種,可先凍存1-2支凍存管,凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些,便于后期復(fù)蘇。購(gòu)買(mǎi)原代細(xì)胞的客戶,要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制,人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右,鼠源的可以傳3代左右,對(duì)于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞,不建議凍存,收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實(shí)驗(yàn)。








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