產(chǎn)品描述

種屬: 人源（Homo sapiens）

組織來源: 外周血（Peripheral blood）

疾病: 急性淋巴細胞白血病（Acute lymphoblastic leukemia）

年齡: 4歲（4 years）

性別: 女（Female）

細胞類型: 淋巴細胞（Lymphoblast）

生長特性: 懸浮生長（Suspension）

拆包 & 存儲

1. 請立即檢查包裝袋是否有破損或漏液

2. 請立即將細胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出，并按照下方操作步驟進行培養(yǎng)傳代

注意：如為凍存管，請收到后立即解凍培養(yǎng)。若來不及解凍，請儲存于液氮中（存儲于負80度，會降低細胞存活率）

培養(yǎng)瓶中細胞操作步驟

對于懸浮培養(yǎng)的細胞，寄送前，我們會將培養(yǎng)基充滿整個培養(yǎng)瓶，以減少產(chǎn)品運輸過程中細胞所受震蕩。

1. 收到細胞產(chǎn)品后，請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細檢查是否渾濁、是否細菌污染。

2. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于37℃培養(yǎng)箱中直至溫度平衡，隨后，在生物安全柜中，轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細胞至離心管中，離心200×g / 5 - 10 min，去除上清后，用5mL培養(yǎng)基吹散細胞。

3. 對上述細胞懸液進行細胞計數(shù)及活力檢測，調(diào)整細胞密度至2-3×10⁵ cells/mL，并轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中。

4. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于含有5%CO₂ 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細胞達到傳代培養(yǎng)的密度，則進行傳代培養(yǎng)。

凍存細胞操作步驟

注意：為保存細胞的高存活率，請收到產(chǎn)品后，立即解凍培養(yǎng)。

1.將凍存管置于37℃ 水浴中來回晃動，迅速解凍。為避免污染，確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速，大約2分鐘。

2. 一旦凍存管中液體融化后，立即取出，采用 70%酒精噴拭凍存管表面。從此步開始，后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。

3.將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mL完全培養(yǎng)基的離心管中， 離心200×g / 5 - 10 min，用真空泵去除含有凍存液的上清。

4. 用完全培養(yǎng)基重新懸浮細胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細胞復(fù)蘇的存活率，請將培養(yǎng)基在37℃水浴預(yù)熱后使用。

5. 將細胞置于含有5%CO² 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

懸浮細胞傳代培養(yǎng)

懸浮細胞的傳代可通過補加或置換新鮮培養(yǎng)基的方式來完成， 具體做法如下：

1. 取出少量細胞懸液進行細胞計數(shù)及活力檢測，當細胞密度達到1.5×10⁶ cells/mL 時，進行細胞傳代培養(yǎng)。

2. 取足量細胞加入到盛有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，將細胞密度維持在5×10⁵ cells/mL。

3. 將培養(yǎng)瓶豎直放置于含有5%CO₂ 的37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。如果細胞達到傳代培養(yǎng)的密度，則進行傳代培養(yǎng)。

培養(yǎng)基換液: 每隔 2 至 3 天。

注意：

1、培養(yǎng)瓶應(yīng)使用帶濾膜瓶蓋，以保持培養(yǎng)基中的空氣和CO₂

2、耐藥細胞，需先無藥培養(yǎng)穩(wěn)定后保種再進行加藥培養(yǎng)，按照3次梯度加藥：最大劑量1/4，最大劑量1/2，最大劑量。

細胞凍存液

離心收集細胞后，加入適量凍存液（每管細胞凍存量達到10的6次方），將凍存管放入凍存盒置于負80冰箱，24h后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮長期保存。

完全培養(yǎng)基配制

該細胞系培養(yǎng)所用基本培養(yǎng)基為RPMI1640,配置完全培養(yǎng)基時需加入10%FBS，1%Anti-Anti。藥物抗性維持加藥濃度為0.1μM Taxol。

使用范圍

本產(chǎn)品僅限于科學(xué)研究，絕不可作為動物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。