碘-碘化鉀染色
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一鍵復(fù)制產(chǎn)品信息
產(chǎn)品推薦
聯(lián)系方式
- 電話:400-1016-218
- 郵箱:355185756@qq.com
- 地址:安徽省合肥市高新區(qū)黃山路602號合肥國家大學(xué)科技園A401室
產(chǎn)品詳情
服務(wù)介紹:
碘-碘化鉀溶液能將淀粉染成藍色,蛋白質(zhì)染成黃色,常用于植物組織化學(xué)鑒定。和形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察。
實驗流程:
脫蠟至水-碘化鉀染色-脫水封片-顯微鏡鏡檢
1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ 20 min-二甲苯Ⅱ 20 min-無水乙醇Ⅰ 5 min-無水乙醇Ⅱ 5 min-75%酒精5 min,自來水洗。
2、碘-碘化鉀染色:
① 同時染植物淀粉粒和細胞壁:
(1)組化筆畫圈圈住組織,滴加適量碘-碘化鉀溶液于組織上染色5 min;
(2)切片入2缸自來水快速浸洗,各2 s,切片入2缸無水乙醇快速脫水,各10 s;
(3)切片直接入植物固綠染液浸染10 s,入3缸無水乙醇快速脫水,各10 s。
(4)切片入正丁醇1 min,二甲苯透明5 min,中性樹膠封片,立即拍照保存實驗結(jié)果,防止褪色。
② 只染植物淀粉粒:
(1)組化筆畫圈圈住組織,滴加適量碘-碘化鉀溶液于組織上染色10 min;
(2)傾去染液,快速水洗立即將切片上的水甩干,入60℃烤箱烘烤半天。
(3)切片入干凈的二甲苯透明3 min,中性樹膠封片,立即拍照保存實驗結(jié)果,防止褪色。
③ 同時染植物淀粉粒和蛋白顆粒:(高蛋白含量的組織,如:黃豆)
(1)切片脫蠟至水,組化筆畫圈圈住組織;
(2)將碘-碘化鉀溶液滴在組織上,染色2 min后,直接將蓋玻片蓋在染液上封片,組織上不能有氣泡,濾紙吸除玻片周邊溢出的染液,立即拍照保存實驗結(jié)果。
結(jié)果判讀:
淀粉粒呈藍色或藍黑色,蛋白顆粒呈黃色,細胞壁呈綠色。
送樣運輸要求:
1.樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h以上,常溫運輸送樣。切勿固定時間過長,切勿冷凍結(jié)冰。
2.石蠟切片常溫運輸,冰凍切片-20℃運輸。
常見問題
答:公司提供兩種運輸方式供老師選擇,1、復(fù)蘇的活細胞:采用常溫發(fā)貨的方式,收到即可觀察密度并判斷是否進行傳代操作。優(yōu)勢是省去復(fù)蘇的步驟,細胞成活率較高。2、凍存的細胞:采用干冰運輸,一般情況下發(fā)貨是2支凍存管,收到后放-80過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲,擇機復(fù)蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快,一般一兩天即可收到,缺點是需要自己復(fù)蘇。
答:我公司提供的細胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息,如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案,根據(jù)客戶的意愿進行選擇!
答:不可以重復(fù)使用,一般從我公司發(fā)出的細胞都需要達到一定的密度后發(fā)出,充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多,通常在3-5%,以維持細胞存活,控制生長速度,不可以用來做細胞培養(yǎng)使用。
答:細胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點點,一般情況下是為貼壁的細胞或脫落的細胞死亡后的產(chǎn)物,懸浮細胞也會有這種現(xiàn)象,出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點。通常,白色的圓點是分散分布的,聚團類的懸浮細胞可能會聚團出現(xiàn)白色的亮斑,技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。
答:一般情況下,我公司建議客戶收到細胞后傳1-2代后即可安排凍存留種,可先凍存1-2支凍存管,凍存的細胞數(shù)量多一些,便于后期復(fù)蘇。購買原代細胞的客戶,要充分考慮該細胞的傳代次數(shù)限制,人源原代細胞大概可以傳7代左右,鼠源的可以傳3代左右,對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細胞,不建議凍存,收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實驗。














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