超薄切片(鎳網(wǎng))
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¥ 0.00
一鍵復(fù)制產(chǎn)品信息
產(chǎn)品推薦
聯(lián)系方式
- 電話:400-1016-218
- 郵箱:355185756@qq.com
- 地址:安徽省合肥市高新區(qū)黃山路602號合肥國家大學(xué)科技園A401室
產(chǎn)品詳情
項目介紹:
該項技術(shù)是組織樣品經(jīng)低溫脫水滲透LR White樹脂低溫聚合包埋,超薄切片70-80nm,用特異性一抗與待檢測抗原結(jié)合然后用帶有膠體金標(biāo)記的二抗與一抗抗原復(fù)合物結(jié)合,在電子顯微鏡下觀察,由于二抗上的膠體金形成一定的電子密度而精確指示出相應(yīng)抗原在亞細(xì)胞水平上的定位。
樣本準(zhǔn)備:
組織取下后立即投入免疫電鏡專用固定液,4°保存,4°冰袋運(yùn)輸,在保存和運(yùn)輸過程中固定液切勿冷凍結(jié)冰。樣品固定后應(yīng)盡快安排做后續(xù)包埋和免疫標(biāo)記實(shí)驗,減少抗原丟失的可能性。
注意事項:
1、1-3min內(nèi)取樣,取樣組織1mm3大小。取材前可提前準(zhǔn)備裝有免疫電鏡固定液A液的培養(yǎng)皿,將小組織塊離體取下后立即投入培養(yǎng)皿內(nèi),用手術(shù)刀在培養(yǎng)皿的固定液中進(jìn)行切割成1mm3的小組織塊。再將切割好的小組織塊轉(zhuǎn)移至裝有新的免疫電鏡固定液的EP管內(nèi)繼續(xù)固定。
2、取材時盡量精確到需要觀察的目的部位(如觀察腎小球取腎皮質(zhì);觀察胰島取胰島豐富的胰尾;皮膚,腸胃等在固定液中易打卷的組織可將組織粘在濾紙上進(jìn)行固定)。
3、取材時一定注意避免鑷子擠壓等機(jī)械損傷,刀片要鋒利避免挫傷組織。
實(shí)驗步驟:
超薄切片機(jī)切片70-80nm超薄切片,鍍膜鎳網(wǎng)撈片,片子4℃保存。
常見問題
答:公司提供兩種運(yùn)輸方式供老師選擇,1、復(fù)蘇的活細(xì)胞:采用常溫發(fā)貨的方式,收到即可觀察密度并判斷是否進(jìn)行傳代操作。優(yōu)勢是省去復(fù)蘇的步驟,細(xì)胞成活率較高。2、凍存的細(xì)胞:采用干冰運(yùn)輸,一般情況下發(fā)貨是2支凍存管,收到后放-80過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮長期存儲,擇機(jī)復(fù)蘇。優(yōu)勢是發(fā)貨快,一般一兩天即可收到,缺點(diǎn)是需要自己復(fù)蘇。
答:我公司提供的細(xì)胞大部分都參考資源庫的培養(yǎng)信息,如ATCC、DSMZ、中科院等等官方平臺。也有少部分細(xì)胞為客戶提供了替代培養(yǎng)方案,根據(jù)客戶的意愿進(jìn)行選擇!
答:不可以重復(fù)使用,一般從我公司發(fā)出的細(xì)胞都需要達(dá)到一定的密度后發(fā)出,充液的培養(yǎng)基血清比例會比正常培養(yǎng)時所用到的培養(yǎng)液低很多,通常在3-5%,以維持細(xì)胞存活,控制生長速度,不可以用來做細(xì)胞培養(yǎng)使用。
答:細(xì)胞在鏡下發(fā)現(xiàn)圓形的白色的點(diǎn)點(diǎn),一般情況下是為貼壁的細(xì)胞或脫落的細(xì)胞死亡后的產(chǎn)物,懸浮細(xì)胞也會有這種現(xiàn)象,出現(xiàn)圓形的光圈一樣的圓點(diǎn)。通常,白色的圓點(diǎn)是分散分布的,聚團(tuán)類的懸浮細(xì)胞可能會聚團(tuán)出現(xiàn)白色的亮斑,技術(shù)老師可以繼續(xù)培養(yǎng)并觀察。
答:一般情況下,我公司建議客戶收到細(xì)胞后傳1-2代后即可安排凍存留種,可先凍存1-2支凍存管,凍存的細(xì)胞數(shù)量多一些,便于后期復(fù)蘇。購買原代細(xì)胞的客戶,要充分考慮該細(xì)胞的傳代次數(shù)限制,人源原代細(xì)胞大概可以傳7代左右,鼠源的可以傳3代左右,對于一些能傳代次數(shù)很少的原代細(xì)胞,不建議凍存,收到后調(diào)整狀態(tài)后即可安排實(shí)驗。










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